发育毒性和胚胎毒性.ppt

4.在一定剂量下，既不呈现母体毒性，也未见致畸作用应在动物可能耐受条件下，最大限度地增加剂量，使其远远高于人类或其它动物实际可能接触的水平，如仍未出现致畸作用，才可做出结论。母体毒性与致畸作用的剂量关系之间，并无固定比值；一般情况下，致畸作用剂量较母体毒性作用剂量为低第32页,共57页，2024年2月25日，星期天第六节发育毒性和致畸作用

试验与评价第33页,共57页，2024年2月25日，星期天一、一般生殖毒性试验为FDA提出的“三段试验”中的I段：雌雄性交配前分别给药14天和60天(分别相当于卵子和精子发育的一个多周期),雌鼠受孕后继续给药至器官发生期末,孕期20天处死孕鼠,剖腹检查子宫和胎鼠.研究对成年雌雄性生殖功能、配子的发生及成熟、交配行为、受精、着床前的发育和着床的影响。第34页,共57页，2024年2月25日，星期天二、传统常规致畸试验（致畸试验）相当于美国FDA致畸和繁殖毒性三阶段试验的第二段(phaseII)；传统致畸试验是评价孕体在胚胎发育期(器官形成期)接触受检物的有害影响。第35页,共57页，2024年2月25日，星期天致畸作用是发育毒性中最重要的一种表现，所以外来化合物发育毒性的评定，主要是通过致畸试验；在致畸试验中除可观察到出生幼仔畸形外，也可同时发现生长发育迟缓和胚胎致死；传统常规致畸试验是评定外源化学物是否具有致畸作用的标准方法。第36页,共57页，2024年2月25日，星期天试验设计动物选择剂量和分组给药时期给药途径其他第37页,共57页，2024年2月25日，星期天(一)动物选择1.选择动物原则最好能符合以下标准(1)胎盘的结构和功能尽可能与人或其它生产实践中的动物一致(2)妊娠过程较短、每窝产仔数较多(3)自发畸形率低第38页,共57页，2024年2月25日，星期天2.选择动物的种类致畸试验通常选用两种哺乳动物一种是啮齿类，一般首先考虑大鼠，其次是小鼠；另一种是家兔雌性用性成熟的，未交配过的动物第39页,共57页，2024年2月25日，星期天3.动物数量每组动物数足以对实验数据进行有意义的解释对大鼠、小鼠，一般是每个剂量组用16-20只；家兔，一般是每个剂量组用8-12只；对较大的动物，如狗、灵长类动物，则每组动物数可少些。第40页,共57页，2024年2月25日，星期天(二)剂量和分组应最少设3个剂量组，另设对照组最高剂量组：可以引起母体轻度中毒，即进食量减少、体重减轻、死亡不超过10%；最低剂量组：不应观察到任何中毒症状；中间剂量组：可以允许母体出现某些极轻微中毒症状。其剂量与高剂量和低剂量成等比级数关系。第41页,共57页，2024年2月25日，星期天亚急性毒性试验的最大耐受剂量作为致畸试验的最高剂量，以其1/30为最低剂量以LD50的1/2-1/3为最高剂量，LD50的1/30-1/50为最低剂量人体或实践中动物实际接触量可供剂量设计参考的数据有3方面：第42页,共57页，2024年2月25日，星期天(三)给药时期给药时期的正确与否是致畸试验成败的关键之一。不同物种的动物，器官形成期不同。给药时期应包括器官形成期的主要阶段。第43页,共57页，2024年2月25日，星期天大鼠小鼠兔交配90d～120d60d～90d成年未交配过着床期孕d4～d5孕d5～d6孕d7～d8染毒期孕d7～d16孕d6～d15孕d6～d18处死期孕d20孕d28孕d29致畸试验日程第44页,共57页，2024年2月25日，星期天(四)给药途径原则上是依据受检物的性质及人类和其它动物可能接触的方式等情况而定，可经呼吸道、经口、经皮、腹腔注射或静脉注射等第45页,共57页，2024年2月25日，星期天致畸试验，一般应在春秋两季进行。因为在这两个季节气候比较适宜，动物受孕率较高，其他季节在保持恒温和光线适宜的标准动物房内合笼，受孕率也可能较高。(五)其他第46页,共57页，2024年2月25日，星期天六、观察指标外观检查：头部、躯干部和四肢骨骼检查：茜素红染色，囟门大小，头骨、脊柱骨、四肢骨、肋骨、胸骨等内脏检查：Bouins液固定2周后检查取出子宫，称取子宫、胎盘和活胎的重量，记录黄体数、着床数、活胎数、死胎数及吸收胎数（大鼠和家兔）第47页,共57页，2024年2月25日，星