首乌益智胶囊对血管性认知障碍大鼠Notch信号通路相关基因和星形胶质细胞的作用研究.pdf

提 要 目的：血管性认知障碍（VCI ）近年来发病率和死亡率逐渐攀升，已成为全社会 重要的公共卫生问题。神经元与星形胶质细胞之间的相互作用，是缺血性脑损伤后神 经元能否存活的关键因素。本研究以Notch信号通路和星形胶质细胞为切入点，通过 首乌益智胶囊治疗前后细胞变化及基因表达水平的改变，探讨其作用机制。为首乌益 智胶囊治疗VCI从细胞水平和基因调控方面提供实验数据和理论依据。 方法：将 SD 大鼠通过线栓法制备大脑中动脉局灶脑缺血/再灌注 VCI 模型，经 Morris 水迷宫实验筛选出 80 只大鼠，随机分为假手术组、模型组、脑复康组、首乌 益智胶囊组，每组 20 只。造模后药物干预 4 周。Morris 水迷宫实验检测各组大鼠行 为学改变；尼氏染色观察海马 CA1 区神经细胞形态学改变；透射电镜观察海马 CA1 区神经元超微结构病理学变化；免疫组织化学法检测海马 CA1 区 GFAP、NGF 的表 达；实时荧光定量 PCR 检测 Notch 信号通路相关基因 Notch1 、PS1 、Hes3 、STAT3、 GFAP、β-APP 的表达。 结果：水迷宫结果表明，首乌益智胶囊组大鼠的定位航行和空间探索实验测试成 绩明显优于模型组和脑复康组(P0.01) 。与模型组和脑复康组比较，首乌益智胶囊组 海马锥体细胞排列较整齐、密集，胞浆中 Nissl 体较丰富；电镜观察细胞器结构基本 正常。首乌益智胶囊组海马 CA1 区 GFAP、NGF 的表达较模型组和脑复康组显著升 高（P0.01 ）。与模型组比较，首乌益智胶囊组大鼠脑组织Notch1 、Hes3 、Stat3 基因 的表达，显著升高（P0.01 ）；与脑复康组比较，亦有明显升高（P0.05 ）。首乌益智 胶囊组 GFAP 基因的表达较模型组和脑复康组显著升高（P0.01 ）。首乌益智胶囊组 PS1 基因的表达较模型组显著降低（P0.01 ），较脑复康组亦有明显降低（P0.05 ）。 首乌益智胶囊组β-APP 基因的表达较模型组明显降低（P 0.05 ）；较脑复康组降低， 无统计学意义（P 0.05 ）。 结论：1.首乌益智胶囊能保护神经元，减轻脑缺血对神经元的损伤，维持神经细 胞结构与功能的完整。2.首乌益智胶囊能提高Notch信号通路Notch1、Stat3、Hes3、 GFAP 基因的表达，促进神经干细胞向星形胶质细胞分化、增殖；促进神经生长因子 (NGF)的合成与分泌，对受损神经元产生保护、营养、修复和再生作用。3.首乌益智 胶囊能降低PS1、β-APP 基因的表达，使Aβ生成减少，减轻Aβ神经毒性，改善学 习记忆能力。4.首乌益智胶囊能显著提高 VCI 大鼠的学习和记忆能力，是治疗 VCI 的有效方药，整体疗效优于脑复康。 关键词 血管性认知障碍；首乌益智胶囊；Notch 信号通路；星形胶质细胞；神 经生长因子 A study of effects on genes in Notch signaling pathway and Astrocyte from Vascular Congnitive Impairment rats by Shouwuyizhi Capsule Speciality: Clinical medicine of integrated TCM and western medicine Author: Chen Chao Tutor: Prof. Li Changsheng Abstract Objective: The morbidity and mortality of Vascular cognitive impairment (VCI) has been higher and higher in recent years. It has become an important common sanitation problem.The interaction between Neurons and Astrocytes is the key factor of the neuron survival during cerebral ischemic injury. In this study, we explored the