费氏丙酸杆菌谢氏亚种和植物乳杆菌亚油酸异构酶结构-中国农业科学.PDF

中国农业科学 2009,42(12):4333-4340 Scientia Agricultura Sinica doi: 10.3864/j.issn.0578-1752.2009.12.027 费氏丙酸杆菌谢氏亚种和植物乳杆菌 亚油酸异构酶结构及酶学性质 1，2 1 1 1 王丽敏 ，吕加平 ，段玉权 ,刘 鹭 1 2 （中国农业科学院农产品加工研究所/农业部农产品加工与质量控制重点开放实验室，北京 100193 ； 中国科学院微生物研究所，北京 100190 ） 摘要：【目的】对来源于植物乳杆菌 （ Lactobacillu plantarum ）和费氏丙酸杆菌谢氏亚种 （Propionibacteriu freudenreichii ssp. shermanii ）亚油酸异构酶酶学特性开展研究，探讨不同来源的亚油酸异构酶酶学性质存在 的差异。【方法】通过酶反应动力学方法及电泳技术测定了酶的最适反应条件、米氏常数、酶的分子量，并在此基 础上，采用高效液相色谱（HPLC）与电喷雾离子化/质谱（ESI-MS）相结合的方法测定了 L. plantarum 和 P. freudenreichii ssp. shermanii 亚油酸异构酶的氨基酸序列。【结果】P. freudenreichii ssp. shermanii 亚油 酸异构酶的最适pH为8.0，最适反应温度是30℃，K -1 -1 -1 =20.53 μmol·L ，V =0.44 μg·ml ·min ；L. plantarum 亚 m max 油酸异构酶的最适pH为7.5，最适反应温度是为50℃，K -1 -1 -1 =17.85 μmol·L ，V =0.73 μg. ml ·min 。【结论】来 m max 源于 L. plantarum 和 P. freudenreichii ssp. shermanii 亚油酸异构酶的全氨基酸序列不同，但两者具有一定 的同源性，且两者酶学特性也有差异。 关键词：共轭亚油酸（CLA）；植物乳杆菌（L. plantarum ）；费氏丙酸杆菌谢氏亚种（P. freudenreichii ssp. shermanii ）；亚油酸异构酶 Studies on the Characteristics of Linoleate Isomerase from P.