白术茯苓汤不同提取方法对脾虚大鼠血管活性肠肽的影响.pdfVIP

LISHIZHENMEDICINEANDMATERIAMEDICARESEARCH2010VOL．21NO．7 时珍国医国药2010年第21卷第 7期 白术茯苓汤不 同提取方法对 脾虚大鼠血管活性肠肽的影响 彭 腾，贾 波，邱建平，李鸿翔，魏 华 (中药材标准化教育部重点实验室成都 中医药大学药学院，四川 成都 610075) 摘要 ：目的 研究白术茯苓汤不同提取方法对脾虚大鼠血管活性肠肽含量的影响。方法 以大黄、厚朴、枳实加饥饱失常 法复制脾气虚证动物模型，运用水提取法、水提醇沉法、半仿生法、半仿生提取醇沉法、生物提取法 5种方法提取样品分 别灌 胃给药后观察各组药物对脾虚大鼠肠组织及血浆 VIP的影响。结果 与模型组比较，水提取法组、半仿生法组均能 降低脾虚大鼠VIP水平，其中半仿生法作用更明显。结论 中药复方用半仿生法提取值得进一步的探 索。 关键词 ：白术茯苓汤； 提取方法； 血管活性肠肽 DOI标识 ：doi：10．3969／j．issn．1008-0805．2010．07．055 中图分类号：R284．2；R285．5 文献标识码 ：B 文章编号：1008-0805(2010)07-1685-01 白术茯苓汤由白术 、茯苓组成，二药配伍应用，始见于张仲景 饮片，混匀，加入适宜的酶预处理；再按 SBE法，采用正交实验 所著 《伤寒杂病论》，明代徐春甫用以专治湿泻 ，并命名为白术茯 L．(6×3。)表 ，于第 1煎和第 3煎的溶剂中加入适宜的消化酶， 苓汤而载入 《古今医统大全》。二药均能益气健脾，白术苦温而 用半仿生 一酶法提取 3次 (加水量分别 为中药量的 12，10，10 善于燥湿 ，茯苓甘淡而善于渗湿，合而用之，一燥一湿 ，健脾除湿 ， 倍)；提取液分别滤过 ，离心，合并上清液，浓缩成0．25g／ml。 相辅相成 ，成为古今治疗脾气虚证及脾虚泻泄的经典小方和常用 1．3 动物 SPF级 SD大 鼠56只，体质量 (180±20)g，雌雄各 药对。课题组前期的研究结果表明，白术茯苓汤水煎剂能显著下 半，由成都中医药大学动物实验 中心提供 ，合格证号：SCXK一09 调 sD大鼠脾虚动物血浆中VIP的升高 ll。为进一步研究该复 — 2006。 方提取方法的药理作用，本课题组采用不同的提取方法系统研究 1．4 试剂 VIP放免试剂盒 由解放军总医院科技开发中心放免 其对脾虚大鼠血管活性肠肽含量的影响。 所提供。 1 材料 2 方法 1．1 动物 SPE级 sD大 鼠56只，体质量 (180±20)g，雌雄各半。 2．1 造模方法 SD大鼠56只，随机分为两组，空白对照组8只， 由成都中医药大学实验动物中心提供，合格证号：0016632。 脾气虚证模型组48只，所有造模组大鼠采取隔 日灌 胃造模药物 1．2 药品 厚朴 、枳实、大黄药材购于成都同仁堂，白术 、茯苓药 1次，每次4ml／200g体质量，喂药当 日禁食 ，饮水不限，次 日喂 材购于成都市中药材公司。 饲不限。喂养42d；空 白对照组则生理盐水4mL／200g体质量灌 1．2．1 造模药物的制备 按厚朴：枳实：大黄为3：3：2的比 服 ，隔 日1次，连续42d。 例，厚朴、枳实先煎沸，再下大黄共煎，煎液过滤，煎煮两次，合并 2．2 实验分组及给药方法 造模结束后，造模组大鼠随机分为6 煎液，浓缩成 1g(生药材，下同)／ml煎液，4℃保存 ，备用。 组 ，每组8只。即模型组、水提取法组 、水提醇沉法组、半仿生法 1．2．2 观察药物 的制备 白术茯苓汤 (下同)水提取法样品制 组、半仿生醇淀组、生物提取法组。于第 43天开始灌 胃给药治 备：称取重量为 1：1的白术、茯苓生药材饮片，混合浸泡30min 疗，1次／d，连续7d。每组均按生药材0．25g／ml的浓度配制药 后合煎 ，煎煮3次后合并药液，过滤 ，浓缩成0．25g／ml煎液。 液，按4m]／200g体重进行灌 胃。 水提取醇沉淀法提取液样品制备 ：上述煎液用95％乙醇调 2．3 标本采集与处理 所有动物处置前禁食 24h，饮水不限。 节浓度至 70％，沉淀过滤，滤液浓缩成 0．25g／ml。