固相萃取技术原理与应用.PDF

中国色谱网论坛在线技术讲座《固相萃取技术原理与应用》 固相萃取技术原理及应用 ——中国色谱网在线技术讲座 活动主办方：中国色谱网（） 活动协办方：天津博纳艾杰尔科技公司（活动独家赞助商） 主讲人： echo_zhang（博纳艾杰尔技术工程师） 主讲内容： 第一部分 固相萃取基本原理与操作………………………P1-3 ·固相萃取吸附剂与目标化合物之间的作用机理………P1 · pH 值对固相萃取的影响………………………………P1 ·固相萃取操作步骤及注意事项…………………………P1 第二部分 固相萃取方法的建立与优化……………………P3-10 ·初步固相萃取方法的建立………………………………P4 ·固相萃取柱的选择………………………………………P4 ·选择合适的固相萃取方法………………………………P5 ·固相萃取方法的优化……………………………………P7 第三部分 固相技术应用实例解析………………………P10-22 ·固相萃取技术在食品分析方面的应用实例解析………P10 ·固相萃取技术在环境领域中的应用实例解析…………P15 ·固相萃取技术在药物分析中的应用实例解析…………P19 主办：中国色谱网 协办：天津博纳艾杰尔科技 活动联系：0571 中国色谱网论坛在线技术讲座《固相萃取技术原理与应用》 一、固相萃取基本原理与操作 1 1 11、固相萃取吸附剂与目标化合物之间的作用机理 固相萃取主要通过目标物与吸附剂之间的以下作用力来保留/吸附的 1）疏水作用力：如 C18、C8、Silica、苯基柱等 2）离子交换作用：SAX, SCX，COOH、NH 等 2 3）物理吸附：Florsil、 Alumina 等 2 p H 2 p H 22、pp HH值对固相萃取的影响 pH 值可以改变目标物/吸附剂的离子化或质子化程度。对于强阳/阴离子交换柱来讲，因 为吸附剂本身是完全离子化的状态，目标物必须完全离子化才可以保证其被吸附剂完全吸附 保留。而目标物的离子化程度则与pH值有关。如对于弱碱性化合物来讲，其pH 值必须小 于其pKa值两个单位才可以保证目标物完全离子化，而对于弱酸性化合物，其pH 值必须大 于其pKa 值两个单位才能保证其完全离子化。对于弱阴/阳离子交换柱来讲，必须要保证吸 附剂完全离子化才保证目标物的完全吸附，而溶液的pH 值必须满足一定的条件才能保证其 完全离子化。 3 3 33、固相萃取操作步骤及注意事项 针对填料保留机理的不同（填料保留目标化合物或保留杂质），操作稍有不同。 1）填料保留目标化合物 固相萃取操作一般有四步（见图1）： � 活化 除去小柱内的杂质并创造一定的溶剂环境。（注意整个过程不要使小柱干涸） � 上样 将样品用一定的溶剂溶解，转移入柱并使组分保留在柱上。（注意流速不要过 快，以1ml/min 为宜，最大不超过5ml/min） � 淋洗 最大程度除去干扰物。（建议此过程结束后把小柱完全抽干） � 洗脱 用小体积的溶剂将被测物质洗脱下来并收集。（注意流速不要过快，以1ml/min 为宜） 主办：中国色谱网 协办：天津博纳艾杰尔科技 活动联系：0571 中国色谱网论坛在线技术讲座《固相萃取技术原理与应用》 柱预处理 样品添加 柱洗涤 分析物洗脱 分析物 干扰物 图1 固相萃取操作步骤（填料保留目标化合物） 2）填料保留杂质 固相萃取操作一般有三步（见图2）： � 活化--除去柱子内的杂质并创造一定的溶剂环境。（注意整个过