量子点的荧光共振能量转移在生物分析中的应用.pdfVIP

量子点的荧光共振能量转移在生物分析中的应用 1 2 2* 1* 2 马慧莲 刘含智 王丽萍 徐淑坤 李惟 （1 东北大学理学院，沈阳 1 10004，2 吉林大学生命科学学院，长春 130023 ） 摘要 量子点良好的光谱特性和自身优点，使其可以作为生物荧光探针，而替代传统荧光染 料，近年来这方面的研究已经取得了一定的进展。目前，量子点在共振能量转移方面的研究， 进一步扩展了它在生物分析中的应用。这里我们介绍了量子点基于共振能量转移原理在生物 分析中的应用，即利用量子点设计的两种类型的蛋白-蛋白特异性结合分析和三种生物传感 器的模型设计。 关键词 量子点，荧光共振能量转移，生物荧光探针，生物分析 1 引言 1.1 量子点发展概况 量子点 （quantum dots, QDs ）又可称为半导体纳米晶体 （semiconductor nanocrystal ）, 是一种由II-VI 族或 III-V 族元素组成的纳米颗粒，目前研究较多的是CdX(X=S,Se,Te)， 粒径尺寸在1-100 nm 之间。与传统荧光探针相比，量子点的激发光谱宽，可以被紫外到红 外区间的任意波长光激发，发射光谱宽度窄并且呈对称分布，通过调节组成和大小可以使其 发射出不同颜色的光[1,2] 。早期的QDs 制备困难，而且虽然经过了不断改进，但由于它是在 水溶液中制备的，不适于生物应用[3] 。自从 1998 年Nie[4]和 Bruchez[5]等制备并完善了量子 点核-壳结构，使其可溶于水，量子产率提高，并且更加稳定，量子点作为荧光探针标记生 物分子的研究已经在细胞成像，免疫分析，DNA 杂交等方面得到了有益的探索[6-8] 。张皓等 人在水相中成功合成了QDs ，方法更简单反应条件也更温和[9] ，本研究小组使用的就是这种 QDs ，对 QDs 的分子修饰进行了进一步的研究，标记了蛋白、胰岛素、小肽等，并成功定 位于细胞膜，细胞核等[9,10]。 1.2 共振能量转移简介 荧光共振能量转移（fluorescence resonance energy transfer ,FRET ）是一种非辐射能量跃迁， 通过分子间的电偶极相互作用，将供体激发态能量转移到受体激发态的过程，使供体荧光强度 降低，而受体可以发射更强的它自己的特征荧光（敏化荧光），也可以不发荧光（荧光淬灭）， 同时也伴随着它们寿命的相应缩短和延长。作为共振能量转移供、受体对，荧光物质必须满足 以下条件：1.供、受体的激发光要分得足够开；2.供体的发射光谱与受体的激发光谱要重叠；3. 供、受体的发射光谱要足够分得开。能量转移的效率和供体的发射光谱与受体的吸收光谱的重 叠程度、供体与受体的跃迁偶极的相对取向、供体与受体之间的距离等有关。人们已经利用生 物体自身的荧光或者将有机荧光染料标记到所研究的对象上，成功地应用于核酸检测，蛋白质 结构、功能分析，免疫分析，细胞器结构功能检测等诸多方面 [1 1,12]。 1.3 量子点应用于共振能量转移研究的优势 传统有机荧光染料吸收光谱窄，发射光谱常常伴有拖尾，这样就会影响供体发射光谱与受 体吸收光谱的重叠程度，而且供、受体发射光谱产生相互干扰。最近的一些报道将发光量子点 用于共振能量转移研究，克服了有机荧光染料的不足之处[13-18]。相对于传统有机荧光染料分子， 基金项目：教育部博士点基金资助项目20020145001 联系人简介：王丽萍，女，1967 年生，博士，副教授，Email ：lipingwang67@. 徐淑坤，女，1939 年生，教授，博士生导师，Email:xusk@ 1 量子点的发射光谱很窄而且不拖尾，这样就减少了供体与受体发射光谱的重叠，避免了相互间 的干扰；由于量子点具有较宽的光谱激发范围，当它作为能量供体时，可以更自由地选择激发 波长，以最大限度地避免对能量受体的直接激发；通过改变量子点的组成或尺寸，可以使其发 射可见光区任一波长的光，也就是说它可以吸收光谱在可见区的任一生色团作能