YYT 0127.1-1993 口腔材料生物试验方法 溶血试验.pdfVIP

中华人民共和国医药行业标准 口腔材料生物试验方法 YY/T0127.卜93 溶 血 试 验 本标准参照采用国际标准化组织技术文件ISO/TR7405-1984齿《科材料生物性能评价》。 1 主题内容与适用范围 本标准规定了齿科材料溶血试验方法。 本标准适用于拟长期与骨和软组织接触的齿科材料 见（附录A）的体外急性溶血性能评价。 2 术语 m 2.1溶血：红血球破裂或溶解，导致血红蛋白进入上清液中。 o c 2.2 试样吸光度值：试样本身的溶血作用及试样颜色的共同作用所造成的吸光度值。 . 2.3 试样底色吸光度值：仅由试样颜色的影响所造成的吸光度值。 2.4 试样溶血吸光度值：试样本身的溶血作用造成的吸光度值。 w 3 原理及方法提要 x f 材料和血液接触时，其溶血成分的存在可导致红细胞破坏，血红蛋白释放，从而使游离血浆血红蛋 z 白增加，产生对机体的毒副作用。任何物质在光谱分析中均有其特定的吸收光谱，可用分光光度计进行 检测，并可进行定性或定量分析。 b . 溶血试验采用兔血。检测试验材料在生理盐水中孵育90min，在最后60min有兔血存在时材料的 溶血性能。溶血性能的检测即根据其血红蛋白的释放量，用分光光度计比色法检测。 w 通过材料与血液直接接触可检测材料的可溶性或释放性成分的溶血性能及材料表面的溶血性能。 4 试剂 w 整个分析过程中，使用分析纯试剂及蒸馏水。 w 4.1 生理盐水：0.9Yo(m/m), 4.2 新鲜抗凝兔全血：每20mL新鲜兔全血中加入1mL2%20g/L）草酸钾生理盐水液。于使用前配 制。贮存于4士2℃下。 5 仪器、设备 5.1离心机：可于750g下离心。 5.2 恒温水浴箱：保持水温在37士1C。 5.3 试管：与离心机相适合的试管。 5.4 分光光度计：可在545nm处测量吸光度。 5.5 移液管：1士。。01mL;10士0.1mL, 5.6分析天平：分度值为0.0001ge 国家医药管理局1993一07一01批准 1993一10一01实施 YY/T0127．1一93 6 试验步骤 6.1稀释抗凝兔血的制备：在8mL的新鲜抗凝兔全血中加入约10mL的生理盐水。调整生理盐水的 用量，使稀释后的抗凝兔血。.2mL在10ml.蒸馏水中于545nm处的吸光度值为0.$-0.3。将稀释抗 凝兔血贮存于4士2`C中。 6.2 阴阳性对照试样制备；每个试管内放置10mL生理盐水为阴性对照试样，每个试管内放置 10mL 蒸馏水为阳性对照试样，各制备三个平行样。 6.3 材料试样制备 6.3.1 按制造厂说明书对材料试样进行消毒、清洗、干燥。未说明的产品，按临床应用常规处理。 6.3.2 在三个试管内分别放置5g试样，试样应以临床应用状态为准。固体试样最大径不应超过 5-mm。 6.3.3 每个试管内加10ml.生理盐水，覆盖全部材料。 6.4 将上述试管置于温度为37士1C的恒温水浴中保温30min，然后在每一试管内分别加入按照6.1 条制备的稀释抗凝免血0.2mL,轻轻混匀，继续于恒温水浴中保温60mine m 6.5 在750g下离心5min.