动物组织中硝基呋喃代谢物残留量的测定方法论文.docVIP

山东理工大学 毕业论文 题 目：动物组织中硝基呋喃代谢物残 留量的测定方法 学 院： 专 业： 食品科学与工程 学生姓名： 指导教师： 毕业论文时间：二ОО八年二月二十五日～六月二十日 共十七周  摘 要 用高效液相色谱-串联质谱（LC-MS/MS）法同时测定动物组织及水产品中呋喃唑酮、呋喃它酮、呋喃西林和呋喃妥因的代谢物。盐酸水解动物组织及水产品中蛋白结合的代谢物，同时加入2-硝基苯甲醛（2-NBA），37℃过夜衍生化。加入氢氧化钠，调节PH值至7.0后，再加入正己烷去除蛋白。后用乙酸乙酯提取，正己烷净化，分析物采用电喷雾电离正离子（ESI+）、多反应检测（MRM）模式检测，內标法定量。在添加浓度0.5~2μg/kg范围内，內标法回收率为89.5%~110.3%；相对标准偏差（RSD）小于11.3%。5-马啉代甲基-3-氨基-2-恶唑酮（5-methylmorpholino-3-amino-2-oxazolidinone，AMOZ）、3-氨基-2-恶唑酮（3-amino-2-oxazolidinone，AOZ）、氨基脲（semicarbazide，SEM）和1-氨基-乙内酰胺（1-amino-hydantoin，AHD）方法检出限为0.5μg/kg。 关键词：液相色谱-串联质谱，，内标法    目 录 摘 要 I Abstract（英文摘要） Ⅱ 目 录 Ⅲ 第一章 引 言 1 1.1硝基呋喃类药物的性质和使用 1.2硝基呋喃类药物的危害及其管理对策 2 1.2.1硝基呋喃类药物的主要危害 2 1.2.2硝基呋喃类药物的管理对策 3 1.3硝基呋喃类物质及其代谢物的样品处理方法 4 1.3.1样品的均质 4 1.3.2提取和衍生化 5 1.3.2.1溶剂提取 5 1.3.2.2水解和衍生化 5 1.3.3样品的净化 6 1.3.3.1液液萃取（LLP） 1.3.3.2基体固相分散技术（MSPD） 1.3.3.3固相萃取技术（SPE） 1.3.3.4在线透析和微量富集技术 1.4硝基呋喃类物质及其代谢物的检测方法 8 1.4.1色谱分析方法 8 1.4.1.1高效液相色谱法 (HPLC) 1.4.1.2联用技术分析法 10 1.4.2分光光度法 12 1.4.3免疫分析法（IA） 1.4.4总结 14 第二章 实验方法 17 2.1 原理 17 2.2 仪器和设备 17 2.3 试剂与溶液 18 2.3.1 主要试剂 18 2.3.2 主要溶液的配制 18 2.3.3 标准物质和标准溶液 19 2.4 实验方法 20 2.4.1 试样制备与保存 20 2.4.2 分析步骤 20 2.4.2.1 洗样 20 2.4.2.2 水解 20 2.4.2.3 提取和净化 20 2.4.2.4 仪器参数与设定 21 2.4.2.5液相色谱-串联质谱测定 22 2.4.2.6定性方法 22 2.4.2.7定量方法 23 第三章 结果计算及讨论 24 3.1 结果计算 24 3.2 总离子流图和保留时间 24 3.3 样品衍生条件的优化 25 3.4 净化条件的选择 26 3.5质谱条件的优化 26 3.6检测限、测定低限、回收率和精密度 29 3.6.1 回收率统计 29 3.6.2 重复性统计 33 3.7 內标法定量 38 3.8 标准曲线图谱及线性范围 39 3.8.1 标准曲线图谱 39 3.8.2 线性范围 41 3.9 质量控制及注意事项 41 3.9.1 质量控制 41 3.9.2 注意事项 42 结论 44 参考文献 45 致谢及声明 48  第一章 引 言 1.1 硝基呋喃类药物的性质和使用 硝基呋喃类药物(Nitrofurans)是人工合成的具有5-硝基呋喃基本结构的广谱抗菌药物，对大多数革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌、某些真菌和原虫均有作用，在低浓度下对上述病原体有抑制作用，高浓度则有杀灭作用，其抗菌作用机理是干扰细菌体内的氧化还原酶系统，使细菌代谢紊乱[1]。硝基呋喃类抗生素主要包括呋喃唑酮(Furazolidone)、呋喃它酮(Furaltadone)、呋喃西林(Nitrofurazone)、呋喃妥因(Nitrofurantoin)等，见图1-1，呋喃类物质均为性质稳定的黄色粉末，无味或味微苦。呋喃西林难溶于水(1:4200)，微溶于乙醇(1:590)，呋喃唑酮几乎不溶于水和乙醇；