鸡CDC25B-mRNA探针制备及其在鸡十二指肠黏膜的原位杂交反应.pdf

畜牧兽 医学报 2009，40(5)：769—774 ActaVeterinariaetZootechnicaSinica 鸡 CDC25B—mRNA探针制备及其在 鸡十二指肠黏膜的原位杂交反应 覃君慧 ，侯放亮。，张 晖 ，包慧君 ，周 强。，李梅英 ，初晓红 ，陈秋生 (1．南京农业大学动物医学院，南京 210095； 2．陕西省家畜改 良站 ，泾阳 713702；3．西北农林科技大学动物医学院，杨凌 712100) 摘 要：应用 RT-PCR方法从鸡胚 中扩增 CDC25B基因片段 ，将其连接于 pGM—Teasy。分别利用 pGM—Teasy中 T7和 SP6启动子及其 RNA聚合酶，以线性化的CDC25B／pGM-Teasy为模板转录合成正、反义DIG标记 RNA探 针 。以合成的地高辛(DIG)标记 的cDC25 mRNA为探针 ，进一步应用原位杂交组织化学方法 (insituhybridiza— tionhistochemistry，ISHH)探查 CDC25B-mRNA在鸡十二指肠黏膜的分布。结果表明，成年鸡十二指肠肠腺上皮