脱细胞小牛肌腱组织形态学和生物力学特性研究.pdfVIP

2013 5 27 5 中国修复重建外科杂志 年 月第 卷第 期 565 · · 脱细胞小牛肌腱组织形态学和生物力学特性研究 1 1 2 1 2 1 2 江燕林 张忆 杨洁亮 罗静聪 ， 秦廷武 ， 【摘  要】    目的 研究反复冻融结合核酸酶处理小牛肌腱脱细胞效果以及对肌腱组织形态、结构、生化成分和力学 特性的影响。 方法 取新鲜1 日龄西门塔尔小牛跟腱48 根，随机分为3 组（n=16 ）：A 组为正常对照组，B 组采用液氮 冷冻/37 ℃复温反复冻融5 次，C 组在反复冻融基础上结合核酸酶处理24 h 。每组取2 根跟腱用于扫描电镜观察，3 根用 于、组织学及免疫组织化学染色观察，3 根用于DNA 残留量检测，8 根用于生物力学检测。 结果 扫描电镜观察示A 、 B 组胶原纤维排列致密有序，形态完整，未见断裂；C 组胶原纤维排列松散，几乎无断裂。阿利新蓝、天狼星红染色及免疫 组织化学染色示C 组糖胺聚糖、Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原、纤维连接蛋白大部分被保留；HE 染色和DAPI 染色示A 、B 组胶原 纤维间可见较多完整的细胞核，而C 组胶原纤维之间未见完整细胞核，但腱内膜上仍有部分细胞核残留。A 、B 、C 组的 DNA 残留量分别为（0.24 ± 0.12 ）、（0.16 ± 0.07 ）、（0.05 ± 0.02 ）μg/mg，C 组显著低于A 、B 组（P 0.05 ）；A 、B 组间差异无 统计学意义（P 0.05 ）。生物力学检测显示，A 、B 、C 组间拉伸强度、断裂应变、刚度和弹性模量差异均无统计学意义（P 0.05 ）。 结论 反复冻融结合核酸酶处理小牛肌腱，可有效去除细胞成分，同时基本保留肌腱原始胶原纤维结构、形态、 大部分细胞外基质成分和力学特性。 【关键词】 脱细胞肌腱 形态学 组织学 生物力学 小牛 HISTOMORPHOLOGICAL AND BIOMECHANICAL CHARACTERISTICS OF DECELLULARIZED BOVINE /JIANG Yanlin1 1 2 1, 2 1, 2 1 TENDONS , ZHANG Yi , YANG Jieliang , LUO Jingcong , QIN Tingwu . Regenerative Medicine Research Center, 2Laboratory of Stem Cell and Tissue Engineering, State Key Laboratory of Biotherapy, West China Hospital, Sichuan University, Chengdu Sichuan, 610041, P.R.China. Corresponding author: QIN Tingwu, E-mail: tingwuqin@ 【Abstract 】 Objective To investigate the effect of repeated freezing and thawing combining nuclease treatment on the decellularization of bovine tendons, and the morphology, structure, biochemical compositions, and m