2014.3.18-SCI发表+MTT检测.docVIP

MTT比色法检测技术概述 MTT法又称MTT比色法，是一种用于检测细胞存活和生长的方法。MTT的全称为3-(4,5-Dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium?bromide，化学名为?3-(4，5-二甲基噻唑-2)-2, 5-二苯基四氮唑溴盐，商品名称为噻唑蓝，是一种黄颜色的化学染料。 MTT法的主要检测原理为，活细胞线粒体中的琥珀酸脱氢酶能使外源性MTT还原为水不溶性的蓝紫色结晶甲瓒（Formazan），该物质能够沉积在细胞中，而死细胞则无此功能。二甲基亚砜（DMSO）能溶解细胞中的甲瓒，用酶联免疫检测仪在490nm波长处测定其光吸收值，就可以间接计算活细胞的数量。在一定的细胞数范围内，MTT法结晶形成的量会与活细胞数成正比。 该方法已经广泛应用于一些生物活性因子的活性检测、大规模的抗肿瘤药物筛选、细胞毒性试验以及肿瘤放射敏感性测定等。该技术的优点是灵敏度高、经济。但是由于MTT法经还原所产生的甲瓒产物不溶于水，需被溶解后才能检测。这会使得工作量增加，也会对实验结果的准确性产生影响，此外溶解甲瓒的有机溶剂对实验者也会产生健康损害。 手机微信“扫一扫”，更多学术齐分享！ MTT比色法的主要技术步骤 MTT比色法主要的实验步骤分为溶液的配制、细胞贴壁和细胞悬浮。 在溶液配制过程中，MTT浓度为5mg/ml， 在配制和保存的过程中，容器最好用铝箔纸包住。细胞贴壁过程中，要收集对数期的细胞，调整细胞悬液浓度后进行细胞孵育，向细胞贴壁后的96孔板中加入具有浓度梯度的药物；再次孵育后再显微镜下倒置观察，加入MTT溶液后将反应的进行离心清洗，再次加入MTT后终止培养；最后加入二甲基亚砜使结晶充分溶解，在酶联免疫检测仪OD490nm处测量各孔的吸光值。在细胞悬浮的过程中，分为收集对数期细胞，调整菌液浓度，经过显微镜观察、培养、酶联免疫检测（OD570nm）、离心、溶解、侧吸光值等步骤。 MTT比色法只能用来检测细胞相对数和相对活力，但不能测定细胞绝对数。在用酶标仪检测结果的时候，为了保证实验结果的线性，MTT 吸光度最好在0-0.7 范围内。MTT一般最好现用现配，过滤后4℃避光保存。MTT有致癌性，对人体健康具有一定的危害，使用的时候要放置溶剂泄露或是接触皮肤。 手机微信“扫一扫”，更多学术齐分享！ 临床case report类型中SCI的发表 Case report 的中文意思是病例报告，病例报告是医学论文中一种常见的体裁，通过对一两个生动的病例进行记录和描述，试图在疾病的表现、机理以及诊断治疗等方面提供第一手感性资料的医学报告。 病例报告是医学期刊中常见的一个栏目。过去，病例报告类论文多是报告一些首次发现的新病例，如爱滋病等都是通过病例报告被人发现的。但随着时间的推移，病例报告类论文目前已主要集中在已知疾病的特殊临床表现、影像学及检验学等诊断手段的新发现、疾病的特殊临床转归、临床诊断治疗过程中的特殊的经验和教训等。典型的病例报告通过对病性形象生动的描述，给读者以深刻的感性认识，使抽象的一般性的疾病表现和诊疗过程有了具体的形象的内容，便于临床医生进一步从理论上掌握疾病的特点与本质。 很多内行的人都知道，这个种类型的SCI易写难发，除非是非常棒的案例，否则接受的可能性极低，一般case涉及到部位特殊：比如阑尾间质瘤、肛管间质瘤、胰腺间质瘤或是肝脏间质瘤等等；或是临床症状罕见：比如头晕的、脚疼的或者既往有胃癌或是肠癌的切除后发生了间质瘤的等等；以及创新的手术方法等等，这类题材都是比较容易引起编辑的关注从而实现SCI的发表。 手机微信“扫一扫”，更多学术齐分享！