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不同氮磷比对藻类生长的影响 丰茂武1，吴云海1，冯仕训1，吴云影2 1. 河海大学环境科学与工程实验中心，江苏 南京 210098；2. 韩山师范学院化学系，广东 潮州 521041 实验采用铜绿微囊藻(Microcystis aeruginosa)，对其在不同氮、磷质量浓度的人工培养基中进行培养，研究不同氮磷比对藻类生长的影响。结果表明，氮磷营养盐在藻类生长过程中是重要的影响因子。在不同磷质量浓度条件下，藻类生长的最佳条件是ρp=0.07 mg·L-1，且在磷质量浓度大于0.07 mg·L-1时，藻类生长状况要优于磷质量浓度小于0.07 mg·L-1时。在不同氮磷比条件下，藻类最佳生长条件为氮磷比等于40:1，藻类生长取决于氮的质量浓度。藻类生长对pH有重要影响。去除过量的氮磷等营养元素是防治湖泊富营养化的重要方法。 铜绿微囊藻 氮磷比 富营养化 限制因子中图分类号：X 文献标识码：A 文章编号：1672-2175（200）0-1759-05湖泊富营养化是当今世界面临的水环境问题之一。由于人类活动的不断加剧，导致了大量营养盐在湖泊的累积，并最终影响湖泊的生态系统。这一世界范围内的现象以引起世界各国科学家的关注，并致力于这方面的研究[1-2]。若干研究表明，湖泊富营养化首先影响浮游植物种群的变化以及初级生产力，最终导致生态系统结构和功能的变化[3-4]。藻类生长受物理、化学、生物等多方面因素的影响[5]。大量营养元素可以促进叶绿素a和浮游藻类生物量的剧增，氮和磷是这些营养元素中的限制因子，在水生生态系统中，氮磷比作为关键因子，常被用来预测藻细胞密度的变化和季节演替[6-7]。它同时作为一项指标，能代表营养盐对藻类生长的限制水平。有研究表明，适当的营养盐可以控制藻类的生长，生物量以及种群结构[8-9]，但就氮或磷哪种营养元素作为浮游植物生长的限制因子，目前尚没有统一的结论。在南太平洋，初级生产者通常被认为是氮限制因子[10]。越来越多的研究表明，在其它生态系统中，如东、西地中海，磷可能是最主要的限制因子[11-13]。在中国，据调查已经有相当数量的湖泊已处于富营养化水平[14]。武汉市东湖，过量的总磷和总氮已经严重影响到藻类的种类组成和数量[15]。在江苏省太湖，光照和磷是藻类生长的重要影响因子[16]。浙江省铜山源水库，也面临着富营养化的趋势[17]。一般来说，藻类健康生长及生理平衡所需的氮磷原子比率为16:1，但不同种类藻细胞的元素组成存在着差异，对各类营养物质的需求也不尽相同，而环境则会优先选择与之相适应的特征藻种形成适者生存的群落[18]。 湖泊富营养化对人类的生产和生活会产生一定的影响，在2007年5月，太湖爆发了大规模蓝藻，导致无锡市自来水供应紧张，严重影响到人们的生活。本文是在室内模拟条件下，以南京市玄武湖中的藻类（铜绿微囊藻）作为实验用藻种，研究了不同的氮磷比对藻类生长的影响，为治理湖泊富营养化提供理论基础，同时也为预测城市浅水型湖泊发生富营养化提供基础理论数据。 藻种购自中科院水生生物研究所。 藻种实验前扩大培养1周，然后饥饿培养2 d，取适量的藻种以4 000 r·min-1的速度离心15 min，弃去上清液，用15 mg·L-1的碳酸氢钠溶液洗涤后离心，重复3次，经无菌水稀释至接种所需的藻细胞密度，藻种的初始密度在5.0×104 个·mL-1左右。 培养液的配制以M培养基[19]为基础，配置成无磷培养基，再以K2HPO4为磷源，设置磷的质量浓度为0，0.01，0.02，0.07，0.2，1 mg·L-1。 培养条件 250 mL三角烧瓶装培养基100 mL，接入经无磷化处理过的藻种，接种密度为5×104 个·mL-1。每组做3个平行样，光照强度2 200 lx，光暗比12 h:12 h，温度为22 ℃，每天手动摇动3次。 将饥饿培养的实验母液充分混合后按所需初始密度分别接入到氮磷比（N:P）为0:1，5:1，10:1，16:1，40:1，80:1的培养液中进行培养,并增加一组对照组，使氮磷比(N:P)为0:0。培养液体积为100 mL。接入藻种后于光照培养箱中进行培养，温度为22 ℃，光照强度2 200 lx，光暗比12h:12h，每一处理设3个重复。 取一定量的试验藻种在显微镜下计数，并按一定的稀释倍数逐级进行稀释，得到相对应的藻细胞密度，在将所得到的系列藻液用紫外分光光度计在650 nm处测其吸光度，以细胞密度对吸光度（A）绘制标准曲线，结果表明，细胞密度与吸光度之间有很好的线性关系，得到的线性方程为： 藻细胞密度（个·mL-1）=2.45×106 A650 (R2=0.9998) 自接种之日起，每天9:00进行取样，取少量藻类培养液用紫外分光光度计在650 nm处测其吸