茯苓菌丝的显微特征研究.pdfVIP

2012年 12月第 14卷第6期 湖北中医药大学学报 Decemberr2012，Vo1．14，No．6 JournalofHubeiUniversityofChineseMedicine ·45 · 【中药园地】 茯苓菌丝的显微特征研究 王昭 ，潘宏林 ，黄雅芳 (1．湖北中医药大学2010级硕士研究生，湖北 武汉430065；2．湖北中医药大学药学院，湖北 武汉 430065) 关键词：茯苓 ；茵丝；显微 ；核相 中图分类号：R284．1 文献标识码：A 文章编号：1008—987X(2012)06-0045-02 doi：10．3969／j．issn．1008-987x．2012．06．15 茯苓是我国传统常用中药材及药食兼用资源，其物种为多 化，并加水补足 1000mL，分装于锥形瓶中，加塞 ，用报纸包扎。 孔菌科真菌茯苓 PodaCOCOS(Schw．)Wo1~ 。野生茯苓在我 将配制的母种培养基置高压灭菌锅内 ，用 1．Okg／cm2压力 (温 国分布较广，但零星分散，茯苓药材多由人工栽培提供，我国是 度 121．3~C)灭菌 30min；试管趁热摆放斜面，冷却备用。培养 世界上唯一进行茯苓栽培的国家 。与其他药(食)用菌相比， 基经灭菌后，放在24℃温箱培养24h，检查灭菌效果，无菌生长 茯苓的基本生物学特性的研究较为落后 。为了给茯苓的深 者方可使用 。 入研究提供依据，须弄清茯苓菌丝的形态、核相。本实验通过对 1．3 Giemsa染色剂的配制 茯苓菌丝进行Giemsa染色，制备水装片观察其核相，并与其他 称量Giemsa粉0．5g、甘油33mL，在研钵中先用少量甘油和 真菌菌丝核相进行比较，得出茯苓菌丝显微形态特征。 Giemsa粉混合，研磨至无颗粒时再将剩余 的甘油倒入 ，56℃保 1 材料与方法 持2h，加入33mL甲醇，置棕色瓶内4C冰箱中备用。将2份0．2 1．1 供试菌株 mo]／L磷酸缓冲液 (pH7)与 1份 Giemsa母液相混合，现用现 茯苓菌株：AH(安徽岳西)，Ts(英山石镇)。 配㈣ 。 对照菌株：草菇，日本滑菇。 1．4 染色样品的制备 1．2 供试培养基 在无菌操作台内，将锥形瓶内的培养基倒入培养皿中，约倒 PDA培养基：原料为马铃薯(去皮)200g，葡萄糖20g，琼脂 至培养皿高度的一半左右，在无菌操作台内待冷却之后待用。 20g。水 1000mL。 将供试菌株的菌丝体接种到平板中央，每种菌株重复操作5次， 配制步骤：马铃薯去皮 (挖去发芽薯块芽眼)，洗净 ，切成薄 每个培养皿插3片盖玻片，在离菌株 1—1．5cm处 ，斜插 1片灭 片，用水冲洗干净，称取 200g，加水 1000mL，煮沸至软而不烂为 菌的盖玻片，置于24：E的培养箱中培养，待生长的菌丝爬上盖 度，用纱布 (用水浸湿后拧干)过滤，取滤液。称取琼脂 20g，加 玻片时取出 。 入马铃薯滤液 中，煮至全部溶化。溶液 中加入葡萄糖，搅拌溶 作者简介：王昭(1987一)，女，湖北中医药大学2010级硕士研究生，研究方向：中药资源的品种质量及开发研究。 通讯作者：潘宏林 (1954一)，男，湖北中医药大学教授 ，研究方向：中药资源的品种质量及开发研究，电话 供参考。从上述测定结果可见 ，不同产地商品飞扬草中有效成