体外展示技术研究进展.pdfVIP

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第22卷 第8期 生命科学 Vol. 22, No. 8 2010年8月 Chinese Bulletin of Life Sciences Aug., 2010 文章编号 :1004-0374(2010)08-0823-08 体外展示技术研究进展 卢明锋1,2* (1 山东师范大学生命科学学院,济南 250014;2 山东理工大学生命科学学院, 淄博 255091) 摘 要:该文系统阐述了核糖体展示、m RN A 展示及 D N A 展示等体外展示技术的实验原理,并对近 年来各种体外展示技术所取得的进展进行了全面的回顾和总结。 关键词:核糖体展示;m R N A 展示;D N A 展示 中图分类号:Q78 文献标识码:A Advance in study on in vitro display technology LU Ming-feng1,2* (1 School of Life Sciences, Shandong Normal University, Ji’nan 250014, China; 2 School of Life Sciences, Shandong University of Technology, Zibo 255091,China ) Abstract: This paper describes the principle of in vitro display technology such as ribosome display, mRNA display, DNA display and reviews in detail the advance in study on in vitro display technology in recent years. Key words: ribosome display; mRNA display; DNA display 要想在实验室里模拟自然进化进行定向加速进 胞中成功分离到了“核糖体- 多肽-mRNA”三元 化,就必须像自然界中的细胞那样想办法将基因型 复合物上的mRNA。Kawasaki[7]于1989年提出可以 与表型连接在一起。为实现上述目的,20 世纪80 应用相似的原理利用无细胞系统进行随机肽库筛选 年代以来多种体内展示技术,如噬菌体展示[1] 的专利。Ellinglon和Szostak[8] [9] 、细 、Tuerk和Gold 于 胞表面展示[2,3]及质粒展示等相继发展起来,并取得 1990年建立了SELEX( systematic evolution of ligands 了巨大的成功[4]。但这些展示技术都需要借助活细 by exponential enrichment)技术。1994年,Mattheakis 胞的生命活动才能实现全部的流程,所以不可避免 等[10]在上述工作的基础上首次建立了实用化的多聚 地存在以下几个缺点[5] ; 受转染效率的限制,这类文 核糖体展示技术(polysome display)。随后的研究表 库的库容1010;对不同于细胞环境条件下的选择无 明,不论是在体内还是体外条件下,核糖体上的新 能为力;不适于具有细胞毒性蛋白质的筛选;不 生多肽的折叠与翻译都是

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