cyclin G2荧光蛋白重组质粒的构建及其对宫颈癌HeLa细胞的作用.pdfVIP

贵州医药 2011年 8月第 35卷第 8期 · 675 · · 论 著 · cyclinG2荧光蛋白重组质粒的构建及其 对宫颈癌 HeLa细胞的作用 遵义医学院组胚教研室 (563003) 魏 娜 郑 洪 ▲ 汤英姿 摘 要 目的 构建包含人cyclinG2基因的荧光蛋白重组质粒，探讨cyclinG2对宫颈癌He— La细胞凋亡的影响。方法 运用RT—PCR和基 因克隆技术构建 pDsRed2一CyclinG2重组质粒 ；脂质体 法转染重组质粒至 HeLa细胞 中，荧光显微镜下观察其蛋 白的表达和定位 ；流式细胞术检测 HeLa细 胞 的凋亡率 。结果 成功地构建 了pDsRed2一CyclinG2荧光蛋 白重组质粒 ，其融合蛋 白在 HeLa细胞 中 的定位为弥漫分布在细胞核和细胞质。转染重组质粒能够促进 HeLa细胞的凋亡。结论 外源性 cy— clinG2转染至 HeLa细胞 中可促进其凋亡 ，抑制细胞增殖。 关键词 CyclinG2 重组质粒 宫颈癌细胞系(HeLa) 凋亡 Construction offluorescentproteinrecombinantplasm idwith cyclinG2anditsfunctioninHeLacells WeiNa，ZhengHong ，TangYingzi．Departmentofhistologyandembryology，ZunyiMedical College，Zunyi563003，China． DepartmentofPathology，ZunyiMedicalCollege，Zunyi563003， China Abstract Objective ToconstructhumancyclinG2geneeukaryoticvectorandstudytheeffect onHeLacellsgrowthinvitro．MethodsThepDsRed2一cyclinG2fusionproteinexpressionvectorswere constructedbyRT—PCR andgenecloningtechniques．Then itwastransferredintoHeLacellsbycat— ionlipofectinreagent．Expression，intracellularlocalizationandfunctionofthisfusionproteininHeLa cellswereobservedby fluorescencemicroscopeaftertransfection．Theapoptosiswereanalyzed by FCM after48hours．ResultscyclinG2geneeukaryoticexpressionvectorwasconstructedsuccessfully， fusionproteinslocateddiffuselyinnucleusandcytoplasm ofHeLacells．ThepDsRed2一G2fusionpro— teincanadvanceapoptosisofHeLacells．ConclusioncyclinG2genecan inhibitthegrowthofHeLa cells． Keywords cyclinG2 Recombinantplasmid Uterinecervixcancercellslines(HeLa) Apoptosis 中图分类号：R446．63 文献标识码 ：A 文章编号：1000—744X(201i)08—0675—05 doi：10．3969／j．ISSN．1000—744X．2011．08．001 子宫颈癌是妇科常见恶性肿瘤之一 。我国每年 学技术的发展，寻找可靠的无创性治疗方法 已成为 有新发病例约 12万，占世界宫颈癌新发病例总数 研究的热点 。本实验通过基因克隆技术将外源性 的 1／4，是发达国家的6倍，且宫颈癌年轻病例有逐