海洋嗜冷杆菌的鉴定及所产低温碱性脂肪酶的基因工程和生物信息学研究.pdfVIP

中国海洋大学硕士论文海洋嗜冷杆菌的鉴定及所产低温碱性脂肪酶的基因工程和生物信息学研究 海洋嗜冷杆菌的鉴定及所产低温脂肪酶的 基因工程和生物信息学研究 摘 要 海洋低温脂肪酶是 (Marinelow-temperatureAlkalineLipase,MLAL)是由一株海洋 细菌EastSeaG5-1415产生的一种胞外酶。本论文主要进行了EastSeaG5-1415菌株的鉴定 低温脂肪酶多克隆抗体的制备及所产低温脂肪酶基因的克隆、序列测定、生物信息学分 析和其空间结构的模建: 从东海深海底泥中筛选得到一株低温脂肪酶产生菌EastSeaG5-1415，对它进行了形 态、生理生化和生长特征的观察，结合对其 16SrRNA序列的分析比较，将其鉴定为嗜冷 杆菌Psychrobacterglacincola，并将该菌株命名为嗜冷杆菌PglacincolaEastSeaG5-14150 利用纯化的低温脂肪酶采用背皮内多点注射和皮下组织免疫相结合的方法对新西兰 白兔进行免疫，制备得到多克隆抗体，再对其进行纯化。用ELISA的方法对其效价进行 检测，结果表明其效价为64000，并用