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去壁 去壁 原生质体 植物细胞 杂种细胞 愈伤组织 杂种植株 植物体细胞杂交过程示意图 杂种植株 融合的原生质体AB 再生出细胞壁 脱分化 愈伤组织 再分化 植物细胞的融合 植物组织培养 植物细胞A 原生质体B 原生质体A 杂种细胞 去 壁 去 壁 人 工 诱 导 方法? 促进融合的方法? 融合完成的 标志 植物细胞B 1.过程 去壁的常用方法: 酶解法(纤维素酶、果胶酶等) 原生质体融合方法: 物理法:离心、振动、电刺激等 化学法:聚乙二醇(PEG) 2、概念: 将不同种的植物体细胞,在一定条件下融合成杂种细胞,并把杂种细胞培育成新的植物体的技术。 3、优势:(与有性杂交方法比较) 克服了不同种生物间的生殖隔离障碍 (远缘杂交不亲和的障碍) 4、未解决的问题: 未能让杂种植物按照人们的需要 表现出亲代的优良性状。 白菜 甘蓝 白菜-甘蓝 “白菜-甘蓝”同普通白菜相比,具有生长期短、耐热性强和易于贮藏等优点。 为什么“番茄—马铃薯”超级杂种植株没有如科学家所想像的那样,地上长番茄、地下结马铃薯? 主要原因是:生物基因的表达不是孤立的,它们之间是相互调控、相互影响的,所以马铃薯—番茄杂交植株的细胞中虽然具备两个物种的遗传物质,但这些遗传物质的表达受到相互干扰,不能再像马铃薯或番茄植株中的遗传物质一样有序表达,杂交植株不能地上长番茄、地下结马铃薯就是很自然的了。 异想天开 所采用技术的理论基础 植物细胞工程 通常采用的技术手段 植物组织培养 植物体细胞杂交 植物细胞的全能性 小结 专题2 细胞工程 应用的原理和方法 研究的水平 研究的目的 细胞生物学和分子生物学 细胞水平或细胞器水平 按照人们的意愿来改变细胞内的遗传物质或获得细胞产品 概念: 前者是细胞水平或细胞器水平上生物技术, 后者是分子水平上的生物技术。 克隆多莉羊技术是 水平上的技术, 培育抗虫棉是 水平上的技术。 细胞工程与基因工程相比: 细胞 分子 思考: 2.1 植物细胞工程 植物细胞工程理论基础: 植物细胞的全能性 细胞的全能性 1、定义: 生物体的细胞具有使后代细胞发育成完整个体的潜能的特性。 2、原理: 生物体的每一个细胞都包含有该物种所特有的全套遗传物质,都有发育成为完整个体所必需的全部基因. ?受精卵 生殖细胞 体细胞 > 3、大小: ?植物细胞>动物细胞 >胚胎干细胞> 注意:受精卵的全能性最高 4、生物体内细胞并没有表现出全能性,而是分化成为不同的组织器官的原因 基因在特定的时间和空间条件下选择性表达的结果 5、植物细胞表现出全能性的条件: ?离体 ?一定的营养物质、激素 ?适宜的温度、pH、无菌等外界条件 以下不能说明细胞全能性的实验是 A.玉米花粉粒培育出植株 B. 转入贮存蛋白基因的向日葵细胞培育出植株 C. 紫色糯性玉米种子培育出植株 D. 核移植获得的组装细胞培育出鲤鲫移核鱼 C 植物细胞工程的基本技术 1、植物组织培养的大致过程包括哪几个阶段? 2、植物组织培养技术的理论基础是什么? 愈伤组织:离体的植物器官、组织或细胞,在培养一段时间以后,通过细胞分裂,形成一种高度液泡化、无定形状态薄壁细胞组成的排列疏松无规则的组织。 脱分化:由高度分化的植物器官、组织或细胞产生愈伤组织的过程,又称去分化。 脱分化的实质和结果分别是什么? 实质是恢复细胞的全能性过程。 结果是形成愈伤组织。 再分化:脱分化产生的愈伤组织在培养过程中重新分化根或芽等器官的过程。 (1)在组织培养实验中,为什么要强调所用器械的灭菌和实验人员的无菌操作? 防止杂菌污染,因为杂菌生长快,会和培养物争夺营养。杂菌生长过程中会产生有害的物质,导致培养物迅速死亡。 (2)在本实验中,切取胡萝卜块根时强调要切取含有形成层部分,原因是这部分容易诱导形成愈伤组织。请思考一下,胡萝卜的其他部分(如茎、叶、花),是否也能培养成小植株,你能用实验的方法进行验证吗? 胡萝卜的其他部分(如茎、叶、花)也能培养再生形成小植株,只是诱导愈伤组织比较困难。 (3)请根据上面的实验过程,概括出植物组织培养技术的流程简图。 植物材料 (消毒) 脱分化 无菌接种、诱导 愈伤组织 再分化 诱导 试管苗 移栽到大田,培养成正常植株 依据学过的知识和实验过程思考回答: 2、决定植物脱分化、再分化的关键因素是什么? 植物激素的种类和比例 1、离体的器官、组织或细胞,如果不进行脱分化处理能否培养成完整的植物体? 不能,因为细胞已经分化,失去了分裂能力。不进行脱分化处理就不能形成愈伤组织 3、为什么诱导愈伤组织的过程中应避光培
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