人皮肤成纤维细胞的培养和鉴定.pdfVIP

维普资讯 中国危重病急救医学2005年 2月第 17卷第 2期 ChinCritCareMed，Feb．2005，Vo1．17，No．2 · 89 · · 论 著 · 人皮肤成纤维细胞的培养和鉴定 李海红 周岗 付小兵 屈振亮 利、同柱 顾绍峰 【摘要】 目的 探索和建立人皮肤成纤维细胞体外分离、培养及鉴定的技术方法。方法 通过酶消化法 分离人皮肤外分泌汗腺 ，在外分泌汗腺生长的同时，成纤维细胞也在生长；用质量分数为0．25 的胰酶和 0．02 的乙二胺 四乙酸 (EDTA)消化分离汗腺细胞和成纤维细胞 ；以Dulbecco改 良的 Eagle培养液 (DMEM)为基础培养基，添加胎牛血清 (体积分数 1O )、青霉素(100ku／L)和链霉素(100mg／L)，置37_C、 体积分数为5 CO 、95％空气、饱和湿度条件下培养。倒置相差显微镜和苏木素一伊红染色 ，观察成纤维细胞