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2017-09-03 发布于山东
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hApoE7 转基因小鼠纯合子的培育和鉴定.pdf

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2004 年 4 月中国比较医学杂志 April , 2004 第 14 卷　第 2 期 CHINESE JOURNAL OF COMPARATIVE MEDICINE Vol. 14 　No. 2 研究报告 hApoE7 转基因小鼠纯合子的培育和鉴定 1 2 2 2 2 张丽春 ,杨　鹏 ,蒋效松 ,薛越强 ,琦祖和 ( 1 首都医科大学宣武医院检验科 ,北京　100053 ; 2 基础医学研究所分子生物学国家重点实验室) ( ) ( ) 　　【摘要】　目的　载脂蛋白 E apoE 是血浆中参与脂质代谢的重要蛋白质 ,并且与迟发型早老性痴呆 AD 相关。为从整体水平研究人突变 ApoE 基因剂量与效应的关系 ,我们拟培育 C BL6hApoE7 纯合子转基因小鼠。方 57 法　将经 Southern 杂交鉴定为阳性的 F1 代小鼠进行互配 ,仔代经 PCR 初筛 ,再行 Southern 杂交鉴定 , 杂交结果经扫描定量分析以确定 hApoE7 基因整合的拷贝数 ,纯合子小鼠的拷贝数为杂合子的两倍。经此法鉴定的纯合子小鼠与正常 C BL6 小鼠进行侧交以进行进一步的鉴定。结果　Southern 杂交鉴定出 F1 代转基因小鼠 6 只 ,F2 代转基 57 因小鼠7 只 ,其中纯合子 3 只。将所得到的纯合子小鼠与正常的 C BL6 小鼠交配 ,仔代鼠经 PCR 鉴定结果全部为 57 阳性。结论　通过培育 C BL6hApoE7 纯合子转基因小鼠 ,发现人ApoE7 基因在转基因小鼠体内可以稳定遗传 ,转 57 基因的遗传特征符合常染色体单位点整合。【关键词】　载脂蛋白 E 类 ;小鼠 ,转基因 ;纯合子 + ( ) 【中图分类号】Q3431 4 　　【