出口番茄制品中乙烯利残留量的检测 液相色谱-串联质谱法.docVIP

前 言 本标准按照GB/T 1.1-2009给出的规则起草。 请注意本文件的某些内容可能涉及专利，本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任。 本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。 本标准负责起草单位：中华人民共和国新疆出入境检验检疫局和Phenomenex（美国）公司。 本标准主要起草人： 本标准系首次发布。 出口检测 液相色谱-串联法 范围 本标准规定了中残留量的液相色谱-质谱测定与确证方法。 本标准适用于中残留量的测定和确证。 2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法。 3 方法提要 试样中的，标法定量。 4 试剂和材料 除另有说明外，所用试剂均为分析纯，水为符合GB/T 6682规定的一级水。 4.1 甲醇：色谱纯。 4.2 乙腈：色谱纯。 4.3 ：色谱纯。 4. 甲酸：色谱纯。 4. 0.1%甲酸：1mL甲酸溶解于水中，并定容至1L。 4.6 丙酮-0.1%甲酸（10+90，体积比）：量取50mL丙酮和450mL0.1%甲酸，混合均匀。 4.7 乙酸。4.8 5%乙酸：5mL乙酸溶解于水中，并定容至100mL。 4.9 氨水。 4. 氨水-甲醇（10+90，体积比）：量取20mL氨水和180mL甲醇，混合均匀。 4.11 乙烯利标准品：CAS No：16672-87-0纯度99.5% 4.12 标准储备液的配制( mg/mL)：标准品，-18℃避光保存。 4.标准中间溶液的配制：吸取标准储备液，用稀释至浓度为10.0 μg/mL4 ℃以下避光保存，有效期为6个月。 4.标准溶液的配制：吸取标准液，用稀释至浓度。标准工作液的配制：，按照进行前处理，用1.0 mL标准溶解残渣，配制成适当浓度的标准工作溶液。4.16 水相滤膜：0.2 μm。5 仪器与设备 5.1 液相色谱串联四极杆质谱仪，配有电喷雾（ESI）离子源。 5.2 天平（感量0.1 mg和0.01 g）。 5.3 涡旋混合器。 5.4 5.5 离心机：000 r/min。 5. 固相萃取仪。 5. 氮吹仪。 6 6.1 提取 6.1.1 番茄样品提取 称取约0 g均质试样于50 mL离心管中， r/min离心10min后，取5mL上清液待净化。 6.1.2 番茄酱样品提取 称取约0 g混匀试样于50 mL离心管中，6.2 净化 mL水、 mL甲醇，用 mL氨水-甲醇（10+90，体积比）洗脱，mL/min，洗脱液于40 ℃以下氮吹干。L0.1%甲酸溶解残渣，涡旋30 s ，用0.2 μm滤膜过滤至样品瓶中，供LC-MS/MS测定。 6. 测定 6.3.1 液相色谱条件 色谱柱：柱，150 mm（柱长）× mm（内径）, 3μm或相当者； 流动相：A：0.1%甲酸，B：，流速：0. mL/min，梯度洗脱条件见表1 表1 液相色谱梯度洗脱条件 时间（min） (%) B(%) 0.0 100 0 2.0 70 30 7.0 70 30 7.1 100 0 10 100 0 柱温：3℃； 进样量： μL。 6.3.2 质谱条件 离子源：电喷雾离子源（ESI）； 扫描方式：多反应监测（MRM）； 使用前应调节各参数使质谱灵敏度达到检测要求，参考条件见附录。 6.3.3 定性测定 (2.5%之内；每种化合物的质谱定性离子至少应包括一个母离子和两个子离子，且样品中定性离子的相对丰度与浓度接近的基质标准工作溶液的定性离子的相对丰度比较，偏差不超过表2规定的范围，则可判样品中存在对应的待物。 表2 定性确证时相对离子丰度的最大允许偏差 相对离子丰度/ (%) (50 (20至50 (10至20 (10 允许的相对偏差/ (%) (20 (25 (30 (50 6.3.4定量测定 样品溶液中待测物6.4 空白试验 除不加试样外，均按上述测定步骤进行。 7 结果计算与表述 结果用色谱数据处理机或按（1）式计算试样中的残留量，计算结果需扣除空白值： ……………………………（1） 式中： X——样品中的残留量，单位为每千克()； ——从标准浓度，单位为每毫升(μg/mL)； V ——样品定容体积，单位为毫升(mL)； ——最终样量，单位为克(g) 8 测定低限、回收率 8.1 低限 本方法测定低限为0.5mg/kg，番茄酱测定低限为0.20mg/kg。 8.2 回收率 分别在番茄和番茄酱中添加乙烯利，添加浓度及其回收率范围的实验数据见表3。 表3 乙烯利的添加回收率试验数据 样