斑马鱼肠道显微和超微结构的研究.pdfVIP

·60· 201 Animal Medicine3 V01．45No．3 HusbandryVeterinary 斑马鱼肠道显微和超微结构的研究 林金杏1，章琳俐2，姚一琳2，高诚1，胡建华1，陈秋生2 (1．上海实验动物研究中心，上海201203； 2．南京农业大学动物医学院，江苏南京210095) 摘要：应用光镜和电镜对斑马鱼肠道的组织形态和超微结构观察分析。斑马鱼肠道可分为前、中、后3段，肠壁由内向外分为黏膜层、肌层和 浆膜层。测量肠道各段的绒毛高度、绒毛纵截面积、柱状上皮高度和肌层厚度，各指标从前肠到中肠和后肠呈逐渐降低趋势，前肠显著高于中肠 状上皮细胞之间的连接复合体发达，上皮细胞间分布着杯状细胞，上皮内淋巴细胞广泛分布于肠上皮下部，而肥大细胞主要分布在后肠上皮基底 膜附近。细胞水平结果表明：斑马鱼肠道执行消化吸收的主要场所在前肠，肠道黏膜免疫机能与免疫细胞位置的分布相关。 关键词：斑马鱼；肠道；显微结构；超微结构 中图分类号：$852．1 文献标志码：A 文章编号2013)03—0060—07 斑马鱼(Danioredo)属于鲤科短担尼鱼属，是 1材料与方法 国际标准化组织认可的实验用鱼类。1994年在冷泉 1．1主要试剂 港召开的斑马鱼研究专题会议以及《Nature))、《Sci— ence》等杂志发表专题评述，标志着斑马鱼已成为继 苏木素、伊红、甲醛、酒精、二甲苯、中性树 小鼠、果蝇、线虫后又一生物学研究的重要模式生 胶、戊二醛、饿酸、Epon812、醋酸铀、柠檬酸铅、 巴比妥钠、口一甘油磷酸钠、氯化钙、硫酸镁、硝酸 物【1-2]。2009年斑马鱼全基因组测序完成使其进一步 成为公认的新型模式生物。作为美国冷泉港实验室的 钴、硫化铵等。 唯一海外分会场，冷泉港亚洲2012年会在苏州举行，1．2实验动物及样品采集 以“以鱼求解：人类发育与疾病的斑马鱼模型”为 AB系斑马鱼饲养于上海实验动物研究中心 主题，主要研讨了斑马鱼作为模式生物在癌症遗传学 ZEBTEC 及治疗，造血模型、先天免疫和疾病等领域的研究。 ：D=14h：10 7．0～7．2，电导率500～ 目前，国内外以斑马鱼为模式生物的研究正逐渐拓展 h，水体pH 和深入，斑马鱼被广泛应用于遗传学口J、发育生物 550 学H。J、神经生物学MJ、免疫学o71、人类疾病模 ～40mm，体长27—30mm，体重0．3—0．6g。斑马 鱼在取材前24h禁食以排空肠内容物。切除斑马鱼 型‘8|、药物筛选‘9|、毒理与环境检测等口0。111方面的 研究。 头部和尾部，腹部经10％中性福尔马林固定24h， 鱼类和哺乳动物生活在非常不同的环境，因此很 取出内脏团，用10％中性福尔马林再固定24h，用 可能造成他们的肠道差异，包括解剖结构和肠道菌 于形态学观察。 群¨2|。目前，对于斑马鱼心血管和免疫系统的研究 1．3形态学观察 o 斑马鱼内脏团二次固定24h后，按常规石蜡包 颇为深入，而消化系统方面，主要以胚胎发育¨3。14 埋、连续切片(5“m)后苏木精．伊红(HE)染色， 和细胞信号传导调控¨弘161为对象的研究较多。了解 肠道的形态结构特点对于鱼类营养、免疫应答和疾病