5分子生物学研究方法(下).pdfVIP

三三 目的基因的克隆目的基因的克隆 AA cDNADNA法法 B PCR法法 C 鸟枪法 D 化学合成法 1 A cDNA法(反转录法) cDNA法克隆目的基因的基本战略 11.总总RNARNA提取提取 2.mRNA纯化 33.cDNADNA合成合成 cDNA法法克隆目的基因的局限性 2 11. 总总RNARNA提取提取 总RNA：tRNA,rRNA,mRNA及小分子RNA mRNA含量少含量少，易受核酸酶攻击降解易受核酸酶攻击降解，损伤严格损伤严格 常用提取方法常用提取方法：Trizol(Trizol(苯酚和异硫氰酸胍苯酚和异硫氰酸胍)) 判断提取效果判断提取效果：：电泳电泳(rRNA(rRNA 28S,18S28S,18S和和5S)5S)以及以及