巴西橡胶树树皮蛋白质组学分析体系的构建.pdfVIP

第 33卷 第 6期 南京林业 大学学报 (自然科学 版 ) Vo1．33．No．6 2009年 11月 JournalofNanjingForestryUniversity(NaturalScience NOV．，2009 巴西橡胶树树皮蛋 白质组学分析体系的构建 袁 坤 ，王真辉 ，丁 璇 ，杨礼富 (1．中国热带农业科学院橡胶研 究所 ，农业部橡胶树生物学重点开放实验室，海南 儋州 571737 2．海南大学农 学院 ，海南 儋州 571737) 摘要 ：巴西橡胶树 (Heveabrasiliensis)是一种重要 的产胶植物 ，其体 内合成和贮存胶乳的地方是乳管系统，而乳管 主要分布于树皮 中。以10年生巴西橡胶树无性系 “热研 88—13”为研 究对 象，采用改进的三氯 乙酸 (TCA)一丙酮 沉淀法提取树皮蛋 白，使用 17cm，pH 4～7的 IPG胶 条进 行双 向电泳，得 到 良好 的蛋 白图谱。PDQuest软件 (Bio．rad)分析银染后 的凝胶 ，共得到约350个蛋 白点。从这些蛋 白点 中随机选取 10个蛋 白点经基质辅助激光 解析 电离飞行时间质谱(MALDI—TOFMS)分析后 ，搜索NCBInr数据库对蛋 白进行鉴定。结果显示，这些蛋 白主 要包括两种来源于 巴西橡胶树 中的重要蛋 白，即橡胶小粒子蛋 白(Smallrubberparticleprotein)和橡胶树凝集 因 子 (hevein)，此外还有一些其他功能和未知功能的蛋 白。 关键词 ：巴西橡胶树 ；树皮 ；蛋 白质组学 ；双 向电泳；MALDI—TOFMS 中图分类号：$722 文献标志码 ：A 文章编号：1000—2006(2009)06—0143—04 Preparation andM ALDI-TOF M S analysisofbark proteinsinHeveabrasiliensis YUAN Kun’ W ANG Zhen—hui，DING Xuan 一，YANG Li—fu ， (1．RubberResearchInstitute，ChineseAcademyofTropicalAgriculturalSciences，KeyLaboratoryofRubberBiology， MinistryofAgriculture，Danzhou571737，China；2．CollegeofAgriculture，HainanUniversity，Danzhou571737，China) Abstract：Heveabrasiliensisisan importantplantoflatexproduction．Theplaceoflatexsynthesisandstorageisthela· ticifersystem ，whichmostlydistributesinbark．Inthisstudy，theteny·ear—oldclone “Reyan88—13’’wasusedasthe experimentmateria1．BarkproteinswereextractedadoptingimprovedTCA—acetone method．UsingpH 4— 7 IPG strip of 17cmtoperform two—dimensionalgelelectrophoresis(2-DE)，agoodproteinpatternwasshowed．PDQuestsoftware (Bio—rad)analysisonthesilverstainedgel，about350proteinspotswereobtained