一种特异性识别非小细胞肺癌A549细胞小分子肽.pdfVIP

Papers 。。一一，一。一。i。。一～一一一一一一。一—。。纛，ReSearCh PI臼1]裁鬻嘶岫 Ⅵw哪．Dibb．蹰．c“ 一种特异性识别非小细胞肺癌 A549细胞的小分子肽4 郭琳琅D”郭颖1’DERIcKLAu”许寅超1’ (哺方医科大学珠扛医院，广州510282；4‰P雎盼矿c讲扣m缸时踟厶c缸c盯ce，妇^usA) 摘要应用～个珠子一个化合物”的组合化学肽库，以期筛选得到特异性识别非小细胞肺癌细胞(A549)的小分子肽．初次 明，小分子肽cNGQGEQc是通过细胞表面整合素a3与非小细胞肺癌A549发生特异性结合． 关键词小分子肽，组合化学，非小细胞肺癌 学科分类号Q516，R734．2 肺癌目前在我国城市恶性肿瘤的发病中已居于 且稳定性强的小分子肽，有望为非小细胞肺癌的特 首位，且其发病率仍呈明显上升趋势．肺癌患者的 异性诊断及治疗提供新的方法． 预后差，平均存活时间仅为1年，一方面是因为尚 1材料与方法 未建市早期、特异性的筛选或诊断方法，患者在明 确诊断后病程往往已发展垒中、晚期，部分已发生 1．1组合化学肽库 转移，另一方面，缺乏理想的治疗手段，临床观察 组合化学肽库的设计是利用化学合成的方法把 仅约20％的非小细胞肺癌患者对抗癌药物有一定 20种氨基酸随即合成在～种树脂胶的珠子上，珠 疗效，且副作用大，对骨髓造血等重要脏器的功能 子直径70～90“m，根据实验需要可以合成含有不 有严重的抑制作用．建立肺癌早期、特异性的诊断 同长度肽链的肽库，本实验采用6个氨基酸长度的 和治疗方法已成为临床肿瘤学亟需解决的重点问题 肽库．理论上，6个氨基酸长度的肽库含有20k 6．4×l 之一．尽管单克隆抗体仍是目前l临床肿瘤诊断和治 07种不同的小分子肽链．具体实验原理和操作 疗的主要研究课题之一，但近年来，小分子肽与单 方法参见文献[2，3]． 克隆抗体相比，因其细胞穿透力强，稳定性好而日 1．2细胞培养 益受到人们的重视，有望成为肿瘤临床应用研究的 本实验所用细胞株包括A549(肺腺癌)， 一个崭新的重要方向【11． 1991年Lam等㈣提出并建立了“一个珠子一胞肺癌)，皿E(非肿瘤性支气管上皮细胞)，Pc．3 条肽链”的组合化学肽库技术，利用该技术可同时 对数万种肽链进行筛选，筛选效率很高．目前国外 学者已成功筛选得到特异性识别不同瘤细胞的小分 子肽M．本研究利用六肽组合化学肽库筛选能与非 (200322一E006l，E0063)． 小细胞肺癌细胞(A549)粘附的小分子肽，通过对 其特异性和结构稳定性的分析，从而得到特异性好 收稿日期；2007-02．27，接受日期：2007。04．02 万方数据 2∞7．34(10) 郭琳琅等：一种特异性识另Ⅱ非小细胞肺癌As孵细胞的小分子肽 ．1081． 癌)。HT-29(结肠癌细胞)，Jllrkel(T淋巴瘤细胞)， 备用细胞孵育，室温1 髓62(白血病细胞)，喇i(伯基特淋巴瘤)均来自 h，PBs冲洗，二抗孵育， 11le Collecno