6黄曲霉相关ARAhPR10基因克隆及原核表达.pdfVIP

基因组学与应用生物学，2009年，第28卷，第2期，第237-244页 Genomicsand AppliedBiology,2009，V01．28，No．2，237—244 研究报告 Research Report 花生抗黄曲霉相关ARAhPRl0基因克隆及其原核表达 谢纯政-，2梁炫强-’李玲2刘海燕- 1广东省农业科学院作物研究所，广州，510640；2华南师范大学生命科学学院，广州，510630 ’通讯作者。Lian9804@yahoo．gom 摘要花生黄曲霉污染已成为制约我国花生及花生制品出口贸易的关键因素。基于花生抗黄曲霉相关 EST序列，RT．PCR法克隆花生ARAhPRl0基因(gb]EU661964．1)，开放读码框471bp，编码157个氨基酸，分 子量16．9 PTAEKITFETKLVEGPNGGS 族的高度保守“P．100p”基序(G宰GG·G)和Betvl保守疏水结构域“GVALP IGKLT LKY”，推测ARAhPRl0是该花生PRl0家族的新成员。其基因组扩增序列长度561 bp，两个外显子 间存在一个长度为87 kD，Ni+-NTA树脂亲和纯化后获 bp的内含子。原核表达ARAhPRl0的融合蛋白约25 得电泳单一条带。纯化的ARAhPRl0融合蛋白具有体外核酸酶活性，预测其具有抗黄曲霉活性。该基因的克 隆及其原核表达融合蛋白的获取为ARAhPRl0功能研究奠定了基础。 关键词花生，黄曲霉，ARAhPRl0基因，原核表达 and ofARAhPR10GenewithResistanceto CloningProkaryoticExpression in A Peanut spergillustTavus Xie u 1‘Li 2 Liu 1 ChunzhengLiangXuanqiangLing Haiyan 1 Research ofLife ChinaNormalUniver- Crops Institute，GuangdongAcademyofAgricultureSciences，Ouangzhou,510640；2College Science，South 10630 sity,Guangzlaou，5 author．LiangSIM@yahoo．coin ‘Corresponding DOh 10．3969／gab．028．000237 Acrucialfactor the with Abstract ofthe inour wassome the restrictingexport peanutproducecountry peanut on aflatoxincontamination．BasedtheESTrelatedA obtainedacDNA of spergillus尼鲫淞resistant，Wesequence the cDNA RT．PCR．TheofARAhPRl0containeda ORF A尺AhPRl0(gbIEU661964．1)frompeanutby single 471 ORFencodeda