论文孔雀石绿脱色菌恶臭假单胞菌菌株M6的分离_鉴定及其生长特性研究_李怡.pdfVIP

微生物学通报 JAN 20, 2009, 36(1): 57~63 Microbiology © 2009 by Institute of Microbiology, CAS tongbao@ 研究报告 孔雀石绿脱色菌恶臭假单胞菌菌株 M6 的 分离、鉴定及其生长特性研究 * 李 怡 何 珊 曹海鹏 杨先乐 ( 200090) 摘 要: 从养殖池污泥中分离了 6 株对孔雀石绿具有脱色能力的菌株, 经过进一步在孔雀石绿营 养肉汤中富集培养及其脱色率的比较, 筛选出对孔雀石绿具有较强脱色能力的优良菌株 M6 。菌株 M6 在 30°C 、150 r/min 条件下对孔雀石绿的脱色率为 97.14 ％, 通过革兰氏染色、电镜对其形态进 行了观察, 用 ATB 细菌鉴定仪对其进行了生理生化鉴定; 通过对其 16S rDNA 序列进行 PCR 扩增 和测序, 与 NCBI 中收录的与其同源性较高的菌株进行了聚类分析并构建了系统发育树。此外, 对 其生长特性也进行了研究。实验结果表明, 菌株 M6 革兰氏染色阴性, 杆形, 端生一根鞭毛, 大小 约为 0.45 µm×0.84 µm, 在孔雀石绿营养琼脂平板上形成的菌落特征为圆形、浅蓝色、粘稠、不易 挑取; 菌株 M6 的 16S rDNA 序列与 GenBank 基因库中假单胞菌属的细菌菌株的 16S rDNA 序列 有 98 ％~99 ％的高度同源性, 菌株 M6 与恶臭假单胞菌 OW-16(登录号：DQ112328.1) 的亲缘关系最 近。结合传统的形态与生理生化特性鉴定以及 16S rDNA 序列分析鉴定的结果, 判定菌株 M6 为恶 臭假单胞菌(Pseudomonas putida)(登录号：EU348741.1) 。此外, 菌株 M6 在 30°C 、150 r/min 条件 下摇床振荡培养的生长曲线为：0 h~4 h 为生长延迟期, 4 h~64 h 为对数生长期, 64 h~80 h 为稳定期, 80 h 以后为衰亡期; 其最适生长 pH 值为 7, 最适生长温度为 30°C, 在转速为 50 r/min~250 r/min 条件下, 其浓度随转速的增加而增大。 : 关键词 孔雀石绿, 恶臭假单胞菌, 鉴定, 生长特性 Isolation, Identification and Growth Characteristics of Pseudomonas putida Strain M6 with Malachite Green Decolorization * LI Yi HE Shan CAO Hai-Peng YANG Xian-Le (Aquatic Pathogen Collection Center of Ministry o