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业生物技术学报 Journal of Agricultural Biotechnology 2006,14 (4): 493~497
·研究论文·
猪胸膜肺炎放线杆菌毒素 基因的克隆、表达及其免疫原 *
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严克霞 , 刘建杰 , 吴 斌 , 汤细彪 , 蔡利军 , 杨明柳 , 陈焕春 , 周 锐 **
(1. 华中农业大学动物医学院农业微生物学国家重点实验室动物病原分室,武汉430070;
2. 海口 工贸（罗牛山）股份有限公司，海口570125)
：
摘要 以本实验室分离的猪胸膜肺炎放线杆菌血清2 型( serotype 2 ，APP-2 ）菌株HB08 的
基因组为模板，扩增了2871 bp 的APP 毒素 的结构基因 ，并克隆到pET-28a 原核表达载体中构建重组表达质粒
pET28 ，转化到大肠杆菌( ) BL21(DE3) ，经SDS和Western blot 分析表明，表达的重组蛋白具有良好
的反应活 。将表达的蛋白经或不经复 处理，与纯化的天然毒素 分别免疫昆明小鼠，同时设PBS 空白对照组，每组 12 只，
， 免后 8CFU(菌落形成单
间隔2 周免疫2 次，采血检测其抗体效价 2 周用致死剂量的APP 血清7 型（APP-7 ）菌株（1.08 10
位, colony form unit)/ 只）腹腔攻击。结果显示，复 蛋白组的保护率为83.3 ％，非复性蛋白组的保护率为58.3％，天然毒素蛋白
对照组保护率为91.7 ％，空白对照组小鼠全部死亡，说明复 的重组毒素 具有良好的免疫原 。
：
关键词 胸膜肺炎放线杆菌; 毒素 ; 克隆; 原核表达; 免疫原
中图分类号 S188 文献标识码 A 文章编号 1006-1304(2006)04-0493-05
: : :
Cloning, Expression and Immunogenic Characterization of Gene of
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YAN Ke-xia , LIU Jian-jie , WU Bin , TANG Xi-biao , CAI Li-jun ,
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