耐辐射异常球菌K_吸收蛋白ktrA基因功能研究_鲜先毅1_2_江世杰1_2_崔广.pdfVIP

－ 中国农业科技导报，２０１４，１６（１）：７６ ８１ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅ ａｎｄ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ ＋ 耐辐射异常球菌Ｋ 吸收蛋白ｋｔｒＡ 基因功能研究 １，２ １，２ １，２ ２ １ ２ ２∗ 鲜先毅 ，　 江世杰 ，　 崔广艳 ，　 刘盈盈 ，　 代其林 ，　 陈　 明 ，　 王　 劲 （１．西南科技大学生命科学与工程学院，四川 绵阳６２１０１０；２．中国农业科学院生物技术研究所，北京 １０００８１） ＋ 摘　 要：耐辐射异常球菌（Ｄ． ｒａｄｉｏｄｕｒａｎｓ Ｒ１）ｋｔｒＡ基因（ＤＲ＿１６６６）编码的Ｋ 吸收蛋白在盐胁迫和渗透胁迫中 起着重要作用。 采用ＱＲＴ⁃ＰＣＲ分析表明在盐和Ｄ⁃山梨糖醇胁迫条件下，野生型菌株中ｋｔｒＡ基因表达均显著 上调。 同时采用融合ＰＣＲ方法和同源重组技术，构建ｋｔｒＡ 基因缺失突变株（ΔｋｔｒＡ），以野生型菌株 ＤＲ做对 照，分别用不同浓度的氯化钾和Ｄ⁃山梨糖醇对突变株进行胁迫处理。 结果显示，突变株 ΔｋｔｒＡ 对氯化钾和 Ｄ⁃山梨糖醇的敏感性明显高于野生型，表明ｋｔｒＡ 基因在菌株耐受高盐和高渗透胁迫时起重要作用。 该结果 为深入研究Ｄ． ｒａｄｉｏｄｕｒａｎｓ Ｒ１菌株中ｋｔｒＡ基因的功能提供了很好的基础。 ＋ 关键词：耐辐射异常球菌；ｋｔｒＡ基因；Ｋ 吸收蛋白；融合ＰＣＲ；非生物胁迫 ｄｏｉ：１０．１３３０４／ ｊ．ｎｙｋｊｄｂ．２０１３．４６４ 中图分类号：Ｑ７８　 　 　 文献标识码：Ａ　 　 　 文章编号：１００８⁃０８６４（２０１４）０１⁃００７６⁃０６ Ｆｕｎｃｔｉｏｎａｌ Ａｎａｌｙｓｉｓ ｏｆ ｋｔｒＡ Ｇｅｎｅ Ｅｎｃｏｄｉｎｇ Ｐｏｔａｓｓｉｕｍ Ｕｐｔａｋｅ Ｐｒｏｔｅｉｎ ｆｒｏｍＤｅｉｎｏｃｏｃｃｕｓ ｒａｄｉｏｄｕｒａｎｓ １，２ １，２ １，２ ２ ＸＩＡＮ Ｘｉａｎ⁃ｙｉ ，ＪＩＡＮＧ Ｓｈｉ⁃ｊｉｅ ，ＣＵＩ Ｇｕａｎｇ⁃ｙａｎ ，ＬＩＵ Ｙｉｎｇ⁃ｙｉｎｇ ， １ ２ ２∗ ＤＡＩ Ｑｉ⁃ｌｉｎ ，ＣＨＥＮ Ｍｉｎｇ ，ＷＡＮＧＪｉｎ （１．Ｌｉｆｅ Ｓｃｉｅｎｃｅ ａｎｄ Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ Ｃｏｌｌｅｇｅ，Ｓｏｕｔｈｗｅｓｔ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ ｏｆ Ｓｃｉｅｎｃｅ ａｎｄ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，Ｓｉｃｈｕａｎ Ｍｉａｎｙａｎｇ ６２１０１０； ２．Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ Ｒｅｓｅａｒｃｈ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ，Ｃｈｉｎｅｓｅ Ａｃａｄｅｍｙ ｏｆ Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，Ｂｅｉｊｉｎｇ １０００８１，Ｃｈｉｎａ） Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｔｈｅ Ｄｅｉｎｏｃｏｃｃｕｓ ｒａｄｉｏｄｕｒａｎｓ Ｒ１ ｐｏｔａｓｓｉｕｍ ｕｐｔａｋｅ ｐｒｏｔｅｉｎ ｅｎｃｏｄｅｄ ｂｙ ｋｔｒＡ ｇｅｎｅ（ＤＲ⁃１６６）， ｐｌａｙｅｄ ａｎ ｉｍｐｏｒｔａｎｔ ｒｏｌｅ ｕｎｄｅｒ ｓａｌｔ ａｎｄ ｏｓｍｏｔｉｃ ｓｔｒｅｓｓ． Ｔｈｅ ｑｕａｎｔｉｔａｔｉｖｅ ｒｅａｌ⁃ｔｉｍｅ ＰＣＲ ａｓｓａｙ ｓｈｏｗｅｄ ｔｈａｔ ｔｈｅ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ ｋｔｒＡ ｇｅｎｅ ｗａｓ