G蛋白对三氟氯氰菊酯抗性棉铃虫电压门控钠、钙通道调控的分析.pdfVIP

．高穗犬淫。 ⑨ Nankai 论文题目：鱼重鱼型三煎氢重蕴醴揎‘眭捣笠皇 皇匡口蕉塑：堡道遵塑蕉塑堡塞 博士学位i￡文 DOCTDRAL 培养院系：生鱼型芏主堕 一级学科：』型塑蔓————一 二级学科：_重地韭L————一 论文作者：—垫』坠————一 指导教师：—型塞亘立噬L—一 九公尢{}叁 南开大学研究生院 甘新月募 20。6年4月 中文摘要 中文摘要 既往的研究表明，昆虫神经细胞电压门控钠通道是拟除虫菊酯类杀虫剂最 主要靶标，神经敏感性下降是拟除虫菊酯类杀虫剂抗性昆虫产生抗药性的主要 原因之一。细胞内游离的钙离子在调节细胞功能方面发挥着独特的作用，而电 压门控钙通道也可能是拟除虫菊酯类杀虫剂的靶标之一。 本研究应用全细胞膜片钳电压钳和电流钳技术，在通道水平比较了三氟氯 氰菊酯抗性及敏感棉铃虫(3～4)龄幼虫中枢神经元兴奋性的高低、电压门控 钠通道电流密度和门控动力学的异同，并重点研究了G蛋白和第二信使对上述 两种品系棉铃虫神经元电压门控钠、钙通道的调控，探讨了G蛋白活性和第二 信使及耦联的磷酸化水平对上述两种通道电流密度和通道动力学的影响，以期 为拟除虫菊酯类杀虫剂抗性棉铃虫神经敏感性下降的长期调节机制和抗性机理 的研究提供重要信息。 三氟氯氰菊酯抗性棉铃虫的汰选工作由中国农业科学院植物保护研究所完 成。抗性品系与敏感品系棉铃虫对三氟氯氰菊酯的LD50分别是0．4903p∥头和 O00419“∥头，抗性品系的相对抗性指数是117．02。 应用常规石蜡切片和苏木精．伊红染色技术，在普通光学显微镜下观察3～4 龄抗性品系和敏感品系棉铃虫神经节、神经元、神经节膜和神经束膜，未见两 种品系问有何差异。 全细胞电流钳技术揭示，诱发抗性品系神经元爆发动作电位所需要的最小 刺激电流强度较敏感品系的高；在相同刺激条件下，抗性品系神经元爆发动作 电位的数目较敏感品系的少。 抗性品系和敏感品系钠通道均是河豚毒素敏感型钠通道。全细胞电压钳技 术显示，两种品系通道激活和失活过程都非常迅速，敏感品系和抗性品系达峰 电流密度和所检测的动力学参数发生改变：(1)抗性品系钠通道电流密度明显 下降(Po．01)，激活电压、峰值电压和半数激活电压分别向去极化方向移动(5～ ● 中文摘要 浜：(2)抗性晶系獭遥遵麴拳蛰失落瞧压巍去援铯方淘移动6熨糯v(尸喵．§1)， 提示抗性晶系钠邋道的失活动力学特性也发生改变。(3)两种钠通道达峰时间 鞠快速失瀵时闷竣蠢发生改变，提示两种钠通道的嚣放与关闭蘧壤变化不明显。 上述电流钳和电压钳实验结果共同掇示，抗性品系神缀元兴奋畿下降、钠通道 不易激活和／或钠通道数目减少，而上述改变可有效地对抗拟除呶菊酯类杀虫剂 在遥莲求平上辩钠蘧道静急经调控律藤，鄂上述改变爵能是挽谯箍铃虫翼春抗 性特性的机理之一。 铀逶遴电流密度、稳态激活曲线粒稳态失滔曲线在长对惩记最蛙绦持豫定。 本研究探讨了抗性品系和敏感品系钠通道在特簿性改变G蛋白活性的药物和第 二信使作用下电流密度和电压敏感性的改变。 两种藏系神经既经破伤风毒素(p强，40黼∥mL)