微流控电泳分离的试样引入技术新进展.pdfVIP

维普资讯 第34卷 分析化学 (FENXIHUAXUE) 评述与进展 第5期 2006年 5月 ChineseJoumalofAnalyticalChemistry 729 734 j”“。…。…‘。…‘。‘…。…‘’…‘。。””： ；评述与进展 ； ；…．．…．．…．．…．．…．．…．．…．．…．； 微流控 电泳分离的试样引入技术新进展 何巧红 方 群 方肇伦 (浙江大学微分析系统研究所，杭州310028) 摘 要 概述了微流控电泳系统中试样引入的进展。分别介绍了固定贮液池式、流通式和取样探针式3种试 样引入技术。共引参考文献33篇。 关键词 微流控芯片毛细管电泳，试样引入，评述 1 引 言 基于微流控学 (microfluidics)的微全分析系统 ( As)，尤其是芯片毛细管电泳 (mieroehip—based cE)分离分析系统在近几年中发展迅猛，已成为 As的发展重点¨ 。在芯片上进行毛细管电泳分 析可以显著地提高分析速度和分离效率，降低试样及试剂的消耗量。同时借助于 MEMS技术，可以在 基片上加工出多个阵列的分析单元，实现高通量的分离分析，甚至还可以加工出各种功能部件，集合成 以电泳分离为中心的微型化、集成化和 自动化的微全分析系统。微流控分析系统的通道内部进行的是 pL至nL级液体的操控，而在其涉及的分析对象和试样储存系统中，试样量通常以 L或 mL计。如何 实现这种宏观系统与微观系统的衔接，是微流控分析系统试样引入技术研究的主要 目标，目前在该领域 内的研究已引起特别的关注。 在 目前文献报道的微流控芯片电泳分离系统中，按试样引入装置的结构不同，试样引入系统主要可 分为固定贮液池式、流通池式、取样探针式3类。衡量芯片上试样引入系统性能的指标包括换样时间、 换样所需试样量、换样是否干扰芯片上正常的分离分析操作及换样和芯片分析系统工作的稳定性等。 以下详细介绍微流控芯片毛细管电泳系统中采用的上述试样引入方法。 2 基于固定贮液池式的试样引入系统 基于固定贮液池的试样引入系统是 目前芯片毛细管电泳系统以及各种微流控系统中采用最多的系 统。图1为典型的带有固定贮液池的十字通道毛细管电泳芯片结构示意图。该系统只需通过控制和切 换各液池中的施加电压即可以实现单一试样的充样和进样分离操作。如需进行多试样分析时，则涉及 到固定试样池内试样的更换问题。即在芯片试样池中的一个试样测定完成后 ，中断分析过程，更换液池 中的试样，然后再开始新试样的分析 础]。通常上述换样操作较为繁琐费时。以激光诱导荧光检测芯 片毛细管电泳系统为例，通常完成一次换样操作的过程是：首先，切断供毛细管电泳分离的工作电压；移 出各液池中电极，清洗电极和试样贮液池数次；然后再加入新试样溶液；插入电极 ；调整光源位置以使激 光斑点重新聚焦于通道上；再接通工作电压恢复工作；总共需十几步完成一次换样操作。以上操作多采 用手工方法进行，步骤繁琐费时，效率低，使得换样的时问常远超过分析时间。在换样阶段需中断试样 的分析操作 ，除了降低系统的分析速度外，还影响系统的稳定性和重现性。vandenBerg等 报道 了一 种用于微流控芯片上换样的 “机器人”式 自动换样系统。该 自动化的换样系统 ，虽然实现了操作的自动 化，但操作步骤模仿手工操作过程，在换样原理上并无改进，换样效率依然不高，一般仍需 10min左右。 为提高进行不同试样分析时的试样通量和分析速度 ，还可采用在一块芯片上加工多个分析单兀，测 2005-084)4收稿；2005—11—24接受 本文系国家 自然科学基金重大项 目(No20575059)和浙江省自然科学基金(No．Y404316)资助 维普资讯 730 分 析 化 学 第34卷 定时一次性引人多个试样，每个单元分析一个试样。 Woolley等 ¨训设计制作了采