利用抑制晶体生长活性再鉴定牛乳骨桥蛋白及其二级结构研究.pdf

智。荔。岛矿嚣棼—嘶弗，毛村净， I ffIIfY『JI『『1眇Ir 118I f7flm3IllIJ4flrl哕 日录 目 录 中文摘要……………………………………………………………………………………………I 英文摘要…………………………………………………………………………………………III 1 ijI言……………………………………………………………………………………………………………………………．1 1．1研究的目的和意义…………………………………………………………………………1 1．2骨桥蛋白的来源及纯化……………………………………………………………………3 1．2．1骨桥蛋白的来源………………………………………………………………………。3 1．2．2骨桥蛋白基因的性状…………………………………………………………………．3 1．2．3骨桥蛋白在机体中的分布……………………………………………………………3 1．2．4骨桥蛋白表达调控……………………………………………………………………4 1．2．5骨桥蛋白的纯化………………………………………………………………………。4 1．3蛋白层析方法及凝胶选择概述……………………………………………………………5 1．3．1层析技术的原理………………………………………………………………………5 1．3．2层析一般目标及方法…………………………………………………………………5 1．3．3层析技术的分类………………………………………………………………………．6 1．3．4层析凝胶选择…………………………………………………………………………7 1．4骨桥蛋白结构与功能研究…………………………………………………………………9 1．4．1一级结构一氨基酸序列比较…………………………………………………………9 1．4．2二级结构预测及结构模型……………………………………………………………lO 1．4．3翻译后修饰…………………………………………………………………………．．1l 1．4．4结构一功能分析………………………………………………………………………1l 1．5蛋白结构研究方法………………………………………………………………………．13 1．5．1二级结构预测方法简介………………………………………………………………13 1．5．2三级结构预测方法…………………………………………………………………．．15 1．5．3二级结构测定方法简介……………………………………………………………．．16 1．5．4三级结构测定方法…………………………………………………………………。18 1．6本课题主要研究内容……………………………………………………………………。19 1．7课题创新点………………………………………………………………………………。19 2材料…………………………………………………………………………………………………………………………。20 2．1实验材料………。…………………………………………………………………………20 2．2主要试剂…………………………………………………………………………………．20 2．3主要仪器…………………………………………………………………………………．．21 3方法…………………………………………………………………………………………………………………………．．22 3．1牛乳骨桥蛋白纯化工艺优化……………………………………………………………．22 3．1．1牛乳前处理及DEAE．Sephacel阴离子交换层析…………………………………．22 3．1．2去除酪蛋白实验……………………………………………………………………。22 3．1．3 3．1．4SOURCE5RPC