应用芯片技术筛查人结肠癌羟基喜树碱多药耐药相关微RNA的研究.pdfVIP

246 论著 应用芯片技术筛查人结肠癌羟基喜树碱 多药耐药相关微RNA的研究 童锦禄 冉志华 陈翔 徐锡涛 聂芳 萧树东 【摘要】 目的 探讨新一类调控分子微RNA(miRNA)在人结肠癌羟基喜树碱多药耐药中的作用， LNA V8．1版芯片 为逆转肿瘤化学治疗的多药耐药性提供新的靶点。方法 运用miRcuRYTMArray 检测人结肠癌细胞swlll6和人结肠癌羟基喜树碱多药耐药细胞swlll6／HcPT的miRNA表达谱，筛 miRNA的靶基因。利用茎环特异miRNA引物反转录特异的n、iRNA，并采用荧光定量PcR法对个别差 异表达的miRNA进行验证。结果用于芯片分析的总RNA的吸光度比值分别为1．93(swlll6)和 1．94(swlll6／HcPT)。琼脂糖变性凝胶电泳进一步验证总RNA质量符合芯片要求。通过芯片检测后 发现swlll6／HcPT相比swlll6表达下调的miRNA共有28条，表达上调的有36条。根据靶基因预 miR一506进行荧光 测结果，我们选取其中2条表达下调hs”miR一452，hsa—miR一373*租1条表达上调hsa 373*表达量不足以由荧 定量PCR验证，hsa—miR一452和hsa—miR一506的结果与芯片相符合，但hsa—miR 光定量PcR检测出。结论miRNA表达量的改变可能在人结肠癌羟基喜树碱多药耐药中起有关键作用。 【关键词】结肠肿瘤；微RNA；多药耐药性；基因表达芯片分析 in humancoloncancerce¨line MicroRNA bymicroarray expre鳃ionpmfilinghydroxycamptothecin-resistant 丁ONG．厂i九一Z“，RANZ^i一^“6【，CHENX缸竹g，XUXi一姒o，NJFF“”g，XjA()S^“一do”g．DPpn以mP”￡o／、 j Gastroenterol‘)gy，RenjiHospttu}，SchoolofMedicine，ShnnghHiinotongUni_Uersit≯，Shnnghni j以s￡i￡“fP 200001，C^i7ln DisP“sP，S^Ⅱ行g^以i o，DigPs￡iuF CDrrPs声。卵clfi”gⅡ“￡^or：RANZ^i一^“n，EmⅡiZ：2一，讼”@oZi”P．s，1．f” microRNAinthe To theroleofanovel molecule 【Abstract】objectiveexplore regulatory inorderto anew humancoloncancercelllineSWlll6／HCPTproVide hydroxycamptothecin—resistant inthe reversalfor resistance．1ⅥethodsJⅥicroRNA hydroxycampto— targetmultidrug expressionpro“ling