仪器分析 第2章_色谱分析法基础-1.pptVIP

第二章 色谱法引论 Generalization of chromatograph analysis 2.1 概述 一 色谱法简介 二 色谱的分类 三 色谱发展历史 四 色谱法的特点 二、色谱的分类 1. 色谱过程中两相的物理状态分类 2. 色谱分离过程的作用原理分类 3. 固定相的使用分类 1. 色谱过程中两相的物理状态分类 四、色谱法的特点 （1）分离效率高 复杂混合物，有机同系物、异构体。手性异构体。 （2） 灵敏度高 可以检测出μg/g (10-6)级甚至ng/g (10-9)级的物质量。 （3） 分析速度快 一般在几分钟或几十分钟内可以完成一个试样的分析。 （4） 应用范围广 气相色谱：沸点低于350℃的各种有机或无机试样的分析。 液相色谱：高沸点、热不稳定、生物试样的分离分析和制备。 2.2 色谱流出曲线及有关术语 一、色谱流出曲线及色谱峰 二、色谱相关术语 三、色谱流出曲线的意义 * * * * * 2.1 概述 2.2 色谱流出曲线及有关术语 2.3 色谱基本理论 2.4 分离度 一、色谱法简介 色谱法早在1906年由俄国植物学家茨维特使用CaCO3粉末作为固定相，石油醚作为流动相分离植物中色素时发现并命名的“色谱法” 图11-1 色谱洗脱过程与色谱图 t，min A B C 信号 A+B+C A B C C B A C B A C C B 色谱法是一种分离技术，其研究对象是复杂的混合物质。 流动相 固定相 色谱柱 色谱图 色谱法分离原理： 根据混合物中各组分在固定相和流动相中具有不同的分配系数，当两相作相对移动时，各组分在两相间进行反复多次分配，就使性质或结构不同的各组分产生了明显的分离效果，从而依先后顺序流出色谱柱。根据色谱流出曲线给出的各种信息，可对各组分进行分析和测定。 两相及两相的相对运动构成了色谱法的基础。 1）气相色谱：气—固色谱（GSC）、气—液色谱（GLC） 2）液相色谱：液—固色谱（LSC）、液—液色谱（LLC） 3）超临界流体色谱 2. 色谱分离过程的作用原理分类 吸附色谱法：不同组份在固定相的吸附作用不同 分配色谱法：不同组份在固定相上的溶解能力不同 离子交换色谱法：离子交换原理 排阻色谱法：利用多孔性物质对不同大小分子的排阻作用。 3. 固定相的使用的形式分类 纸色谱： 薄层色谱： 柱色谱： 三、色谱法的历史 俄国植物学家茨维特Tsweet 首先将这种层析现象用于分离植物色素红萝卜素、叶黄素和叶绿素A、B，并将这种方法命名为色谱法 ——液-固色谱（是最先创立的色谱方法） 20年后（1931）Kuhn（库恩 ）为了证实蛋黄中的叶黄素是植物叶黄素与玉米黄质的混合物，参考了Tsweet 的论文并采用的色谱法进行其研究工作（吸附色谱） 1938年，Martin（马丁 ）和Synge（辛格 ）采用水分饱和的硅胶为固定相，以含有乙醇的氯仿为流动相分离乙酰基氨基酸并且提出了色谱塔板理论 ——分配色谱 1951年， Martin 和James采用气体作为流动相，以自动滴定仪作为检测器分析脂肪酸 ——气相色谱法。建立形成色谱学理论中有着重要地位的塔板理论和Van Deemter方程，以及保留时间、保留指数、峰宽等概念。 1952年，A.J.P.Martin和 R.L.M.Synge获得了诺贝尔化学奖。在他们获得诺贝尔奖的论文中还指出“采用气体代替液体作为流动相分离各类化合物的可能性是存在的。” “如果流动相用气体来代替，对分离更有好处”，“使用非常细的颗粒填料和柱的两端施加较大的压差，应能得到较小的理论塔板商” 1957年，Golay又提出了使用毛细管柱代替填充柱可获得极高的分离效率——毛细管气相色谱法 从此，气相色谱法得以蓬勃发展。气相色谱学的诞生及其获得广泛的应用使色谱学逐渐成为分析化学的一个重要分支学科 1960年代，为了分离蛋白质、核酸等不易汽化的大分子物质，气相色谱的理论和方法被重新引入经典液相色谱。1960年代末科克兰等人开发了世界上第一台高效液相色谱仪，开启了高效液相色谱的时代。 1971年科克兰等人出版了《液相色谱的现代实践》一书，标志着高效液相色谱法 (HPLC) 正式建立。 1937-1972年，15年中有12个Nobel奖是有关色谱研究的！ 混合组分的分离过程及检测器对各组份在不同阶段的响应 一、色谱流出曲线 由检测器输出的信号强度对时间作图，所得曲线即色谱流出曲线，也称色谱图 。 1、色谱峰（peak）：当某组分从色谱柱中流出时，检测器对该组分的响应信号随时间变化所形成的峰形曲线。 2、基线（baseline）：在正常操作条件下，色