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miRNA-126抑制A549细胞迁移和侵袭作用研究*
孙艳芹1、刘建强2
【摘要】目的:研究microRNA-126(miR-126)对非小细胞肺癌(NSCLC)细胞迁移和侵袭能力的影响。方法:利用脂质体介导法将构建好的miR-126过表达质粒转染至NSCLC细胞株A549细胞(A549/ miR-126组),并设空质粒转染组(A549/mock组)和空白对照组(A549组)。利用RT-PCR技术检测三组细胞中miR-126及EGFL7蛋白表达水平,采用细胞划痕实验观察细胞迁移能力,Transwell小室法分析三组细胞侵袭能力的差异。结果:RT-PCR检测发现,与另两组细胞相比,A549/ miR-126组细胞中EGFL7水平较高,差异有统计学意义(P<0.01A549/miR-126组 24h侵袭细胞数分别为(28.6±2.322),36h侵袭细胞数为(29.2±3.7683)个,A549/mock组为(49.8±3.7014)个,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:miR-126可上调EGFL7的表达,抑制A549细胞的迁移和侵袭能力。
【关键词】非小细胞肺癌(NSCLC);EGFL7;miR-126
miR-126 may inhibit A549 cell migration and invasiveness by targeted EGFL7
Sun Yanqin1, Liu Jianqiang2
[Abstract] Objective: To study the impact of miR-126 on A549 cell migration and invasiveness. Methods: Constructing miR-126 over expression plasmid and transfecting it into A549 cells by liposomes, that is A549/ miR-126 group, and set an other control group(A549 group) and an empty vector transfected group(A549/mock group). Detecting EGFL7 levels in three groups by RT-PCR, observing cell migration changes by cell scratch test, and analyzing the invasiveness ability of three groups by Transwell chamber method. Results: EGFL7 of A549/ miR-126 group significantly reduced relatively to the control groups by RT-PCR; In the cell scratch test, compared with the control group, cell migration distance of A549/ miR-126 group reduced relatively; For the Transwell chamber experiment, number of invasive A549/miR-126 cells after 24h and 36h is respectively (28.6 ± 2.322) and (29.2 ± 3.7683), while A549/mock group was (49.8-+3.7014), which was significantly reduced, the differences show statistically significant. Conclusion: miR-126 can upregulate EGFL7 expression and might inhibit the migration and invasion of A549 cells.
Key words: NSCLC; EGFL7; miR-126
最新统计,在欧美发达国家和我国城市中,肺癌已位居男性恶性肿瘤发病率、死亡率的首位,女性恶性肿瘤发病率的第二位死亡率位。目前肺癌发病率呈不断上升的趋势其中占肺癌的80以上。microRNA(miRNA)是长度为18-24 nt的单链、非编码核苷酸分子,miRNA突变和异常表达与各种人体肿瘤的发生、发展关系密切,miRNA可作为癌基因或抑癌基因而起作用。作为类表皮生长因子,最初发现其在血管内皮中高表达。miR-126位于EGFL7基因3′-UTR
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