GST和His标记的重组蛋白制备及吸附纳米ZnO的研究.pdfVIP

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2017-08-21 发布于北京
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GST和His标记的重组蛋白制备及吸附纳米ZnO的研究.pdf

第31卷第2期北京理工大学学报 V01．31No．2 of 2011年2月Transactionsof Institute Feb．2011 Beijing Technology GST和His标记的重组蛋白制备及吸附纳米ZnO的研究宋磊，陈劲春 (北京化工大学生命科学与技术学院，北京 100029) coliBL21细列的目的基因片段，克隆到原核表达载体pGEX一4T-3中，筛选及鉴定阳性重组子pGEX—His，转化E 统进行纯化．通过SDS电泳和Westernblot分析鉴定，由LC—MS／MS质谱分析确定所得蛋白为目标产物．通过蛋白结合纳米无机材料的亲和吸附实验结果证实，重组的新蛋白表现出对纳米ZnO特异吸附的生物活性．关键词：谷胱甘肽；6聚组氨酸；基因重组；蛋白表达与纯化；亲和吸附中图分类号：Q819 文献标志码：A 文章编号：100卜0645(2011)02—0240—04 ofRecombinantProteinwith Preparation GSTand His andIts Tag ZnO—BindingQuality SONG CHEN Lei， Jin—chun ofLifeScienceand ofChemical (College Technology，BeijingUniversity Technology，Beijing100029，China) Abstract：The usedas to pET一28a(+)was plasmid templatesPCR—amplifyobjectivefragment the 6×Histidinewith were containingupstream sequencedesignedprimers．PCRproducts ligated intoa vector E．coliclones recombinant prokaryoticexpressionpGEX-4T一3．Positivecontaining wereselectedand transformationinto pGEX—His identified，followed E．coli plasmid by BI。21 cellsandinductionwithIPTG．TherecombinantGST—Hiswas withGST protein expressed andHis