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利用废弃面包发酵生产丁二酸(琥珀酸) 摘要： 一个新颖的生物概念,利用废弃面包作为单一的营养源生产一种营养丰富的原料从而发酵生产丁二酸产品已由产琥珀酸放线杆菌培育出来。废弃面包被用于泡盛曲霉和米曲霉的固态发酵，其分别生产富含淀粉水解酶和蛋白水解酶的酶复合物。由此产生的发酵固体被直接添加到面包悬浮液去生产一个包含超过100 g / L葡萄糖和490 mg / L的游离氨基氮（FAN）的水解产物。一个一阶动力学模型被用来描述最初面包在葡萄糖和游离氨基氮（FAN）图像质量比的影响。面包的水解物被作为单一的原料给产琥珀酸放线杆菌发酵槽，这导致产品47.3 g/L的琥珀酸的收益和1.16克SA /g葡萄糖的生产率和1.12 g / g/L h，这对应一个总收率为每克面包0.55 g琥珀酸。比之迄今为止来自媒体报道的其他的食品垃圾，这是最高的琥珀酸产量。所提出的方法可以用来把没有价值的食品垃圾转化为丁二酸，一个可持续的化学平台产品。 关键词：泡盛曲霉 米曲霉 产琥珀酸放线杆菌 生物炼制 食品垃圾 1.介绍 食物垃圾是最大的城市固体垃圾来源，在的不同国家介于12%和39%之间，如美国[1],香港[2]和新加坡[3]，这导致严重的环境问题。利用食物垃圾在生物炼制中作为再生原料获得化学品和能源产品，瞄准固体垃圾问题和过度依赖石油作为主要的化学品和能源[4,5]来源已成为一个有前途的选项。包含在食物垃圾中的营养物可以被微生物转化成所需产品,如生物燃料(6 - 8)、功能化学品[9]和单体的生物塑料[10]。 丁二酸（SA），作为许多化学物质的前体[ 11 ] 每年有30000吨的生产能力和2.25亿美元[ 12 ]的产值。吸引了致力于研发发酵SA产品作为一个替代当前不可持续的石化路线。这种生物SA产品由于操作条件温和且低依赖于单一原料(13、14) 故具有较低的能量消耗。常见的应用于生物发酵生产SA的微生物是产琥珀酸放线杆菌[ 15 ]，琥珀酸厌氧螺菌[ 16 ]，曼琥珀酸 [ 17 ]和重组大肠杆菌[ 18 ]。使用这些微生物将食物残渣转化成SA的可能性已被Yu等人[ 19 ]探索。检查产琥珀酸放线杆菌从玉米芯中获得的SA产品。由Li等人[ 20 ]演示产琥珀酸放线杆菌从橙皮获得SA产品 食物中的营养成分被以淀粉和蛋白质等大分子等形式存储，为了促进微生物的生长，这些大分子需被分解成如糖和氨基酸等有用的形式。通常，使用淀粉酶和蛋白酶酶法水解能有效地促进这一过程[21].与基于材料的木质纤维素水解的方法比较 [ 22 ]，酶解有几个突出的优势。这包括反应条件温和，避免使用危险化学品和降低产生发酵抑制剂的风险。除了在水解中使用商用酶，固态发酵[ 23 ]是一种优先选择去生产诸如高浓度酶等由于缺乏自由水和低蛋白质分解优势的酶[ 24 ]，各种各样的微生物使用固态发酵(SSF)，其中丝状真菌被广泛利用。Du等人[25] 开发了一种从黑曲霉糖化酶和在小麦上固态发酵(SSF)上的蛋白酶的生成策略 术语 A 方程的线性回归常数(4) (g/L) B 方程的线性回归常数(4) (g/L) C(t) 葡萄糖/游离氨基氮（FAN）在时间t时的浓度(g / L为葡萄糖，mg / L为游离氨基氮（FAN） C∞ 葡萄糖的饱和浓度/游离氨基氮（FAN）(g / L) (g / L为葡萄糖，mg / L为游离氨基氮（FAN） K 动力学常数(h?1)。 FAN 游离氨基氮 OD660 在660nm的光学密度 SA 丁二酸(琥珀酸) SSF固态发酵 T 时间(小时) TS总糖(g / L) x初始面包质量比(w / v %) 这些酶分别被利用来水解没有谷蛋白的面粉和富含碳和氮streams的谷蛋白。Dorado等人[26] 设计了另一种结合淀粉水解和真菌自溶蛋白的策略。在这一战略中，在55?C时A.泡盛曲霉和A米曲霉固态发酵固体被添加到小麦麸和麸皮中来产生一个营养完整流，其随后被用于发酵SA生产。Melikoglu [ 27 ]开发了一种当采用固态发酵时使用A. awamori的多酶解糖化酶和蛋白酶方案。这被用于从废弃的面包片和小麦面粉中以后续的水解反应来生产营养丰富的水解产物。考虑到废弃的面包和小麦的相似的成分，它应该有可能使用一种新的生物生产的发酵培养基（如图1所示）利用废弃面包作为原料获得中间发酵产品。 2. 材料和方法 在本研究中所有的化学物质均从Sigma–Aldrich处获得，我们另有规定除外。 2.1微生物 A.泡盛曲霉ATCC 14331被用于生产淀粉水解酶。一个工业菌株a . oryzae完全来自于大豆酱油由发起者厦门食品有限公司，香港慷慨提供。它被用来生产蛋白水解酶。他们的存储和孢子接种物的制备已在先前的出版物中描述[ 25 ]。产琥珀酸放线杆菌AT