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微生物合成ε-聚赖氨酸的研究进展.pdf
微生物合成 £-聚赖氨酸的研究进展
耿伟涛 ,宋存江 ,解慧 ,冯俊 ,谢晨庚 ,王淑芳
1(南开大学分子微生物与技术教育部重点实验室,天津,300071)
2(南开大学生物活性材料教育部重点实验室 ,天津 ,300071)
摘 要 介绍 了国内外 s一聚赖氨酸的研究和生产状况,介绍 了s一聚赖氨酸合成机理 。特别是对于 e一聚赖氨酸合
成酶结构 以及决定 s一聚赖氨酸聚合度大小的催化合成模型进行 了综述。另外,作者结合 自己的研究展望 了8一聚
赖氨酸研究的发展趋势 。
关键词 s一聚赖氨酸,合成机理,s一聚赖氨酸合成酶,催化模型
20世纪70年代末,Shima等在 白色链霉菌 (Step. 生 长。Kahar采 用 两 步 法 对 Streptomycesalbulus
tomycesalbulus)的发酵液中发现了8一聚赖氨酸 (8一po— No.410进行发酵实验 ,第 1步控制 pH高于5.0,
ly.L—lysine,8一PL)…。它是 由25~35个L-lysine组成 使菌体大量繁殖 ,第 2步控制 pH在 4.0附近 ,进行
的同型聚合物 ,通过 .羧基与 e.氨基形成酰胺键连 8-PL的合成。发酵94h,产量可达5.7g/L。在 96h
接而成 ,相对分子质量为 3500~4500。 后继续补加葡萄糖与硫酸铵 ,最终发酵7天 ,产量达
8一PL是一种阳离子多肽 ,对革兰氏阴性菌和革 到了48.3g/L。
兰氏阳性菌具有广谱的抗菌活性 ,并具有安全可降解 s—PL在 日本 Chisso公司已经实现了千 吨级的商
的特点。因此 ,已在许多国家作为食品防腐剂使用。 业化生产 ,而在我 国相关研究起步较 晚。2008年 9
2003年 ,日本 Chisso公司 向美 国食 品药 品管理局 月,浙江银象生物工程有限公司聚赖氨酸工业化试生
(FoodandDrugAdministration,FDA)提交 了 8.PL用 产成功。2006年 ,南京工业大学徐虹等 在土壤 中
做食品添加剂的申请 ,2004年 1月获得应用许可。£一 分离到 1株北里孢 氏菌 (Kitasatosporasp.),命名为
PL除了可作为食品防腐剂之外,还涉及医药、化工和 Kitasatosporasp.PL6—3。通过 120h的补料分批发
环保材料等应用领域。随着 s-PL高产菌株 以及控 酵,产量能达 13.9g/L,产物分子质量为5.O1kDa,聚
制 pH发酵策略 的采用 ,8一PL的工业化生产技术 已 合了40个赖氨酸单体 ,分子量和聚合度均是 目前报
趋于成熟。 道最高的。2010年 ,该研究组又进行 了 PL6.3的突
变株 MY5.36的菌体 固定化条件下的发酵研究 ,体
1 £一PL生产研究及其合成菌
系中产物终浓度为 34.11g/L,且固定化 的细胞在实
Shima等人分离的SteptomycesalbulusNo.346(保 验中可以重复使用 5次,总计 526h。天津科技大学
藏为 S.albulusNBRC14147)在基本培养基进行摇瓶 贾士儒等 2010年 2月报道 了 1株 8-PL生产菌株
发酵 ,生长 96h产量为0.2g/L¨。为了改善生产状 淀粉酶产色链霉菌 TUST一2,对 TUST-2进行诱变育
况 ,Hiraki等人通过化学诱变育种得到 了S.albulus 种 ,突变株在 5L发酵罐的产量达到了 32g/L。江南
No.410 ,该突变株在 M3G培养基 中,30~(2摇瓶培 大学毛忠贵 。。等报道了 1株 Streptomycesgriseofus—
养96h产量可达 1.2g/L。 C1Z$,在 5L发酵罐 中进行补料分批发酵之后产量可以
在进行 £一PL发酵生
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