TaqMan+PCR反应在EGFR基因突变检测中的应用.pdfVIP

广东医学摇 圆园员员年缘月第猿圆卷第怨期摇 怎葬灶早凿燥灶早 酝藻凿蚤糟葬造 允燥怎则灶葬造摇 酝葬赠援 圆园员员，灾燥造援 猿圆，晕燥援 怨 ·员员 苑 · 栽葬择酝葬灶 孕悦砸反应在耘郧云砸基因突变检测中的应用 褚玉新，姚颐 武汉大学人民医院干细胞治疗中心（武汉 猿园园园园） 摇 摇 【摘要】摇 目的摇 研究一种快速、敏感、高通量的方法来检测非小细胞肺癌患者是否存在耘郧云砸基因突变，以 指导吉非替尼的分子靶向治疗。方法摇 收集怨 例非小细胞肺癌标本，先做耘郧云砸基因测序，序列比对，然后用 栽葬择酝葬灶 孕悦砸反应检测 耘郧云砸基因突变。比较两种检测结果的一致性。结果摇 怨 例患者中怨猿 例应用栽葬择酝葬灶 孕悦砸反应的检测结果和直接基因测序的结果完全一致，员例患者经直接测序，没有探测到耘郧云砸基因突变，而利用 栽葬择酝葬灶 孕悦砸反应却检测到了一种突变。该患者对吉非替尼化疗敏感。结论摇 应用栽葬择酝葬灶 孕悦砸反应检测耘郧云砸 基因突变是一种快速、敏感、高效的方法，对于判断非小细胞肺癌的患者是否要用吉非替尼有重要的指导价值。 【关键词】摇 栽葬择酝葬灶 孕悦砸；非小细胞肺癌；耘郧云砸；基因突变；靶向治疗 摇 摇 肺癌是目前全球发病率最高的恶性肿瘤之一，其 猿员猿园测序分析。 ［员］ 中约愿缘豫为非小细胞肺癌 。目前，靶向治疗肺癌研 员援 摇 用栽葬择酝葬灶 孕悦砸反应检测耘郧云砸基因突变摇 先用 究较多的是以吉非替尼为代表的耘郧云砸酪氨酸激酶抑 孕则蚤皂藻则 孕则藻皂蚤藻则缘郾园软件设计引物和栽葬择酝葬灶 酝郧月荧  ［圆］ 制剂（耘郧云砸原栽运陨） 。有研究者发现，体细胞中耘郧鄄 光标记的探针。针对特定等位基因的引物和探针的序 云砸基因突变与非小细胞肺癌对吉非替尼的敏感性密 列见表 员。用粤月陨公司的苑缘园园 砸藻葬造 栽蚤皂藻 孕悦砸 杂赠泽贼藻皂 ［猿］ 切相关 。因此，耘郧云砸基因突变检测对于判断非小 来做栽葬择酝葬灶 孕悦砸和耘郧云砸 的基因分析。严格按照仪 细胞肺癌对吉非替尼是否敏感至关重要。我们利用缘忆 器说明书操作。栽葬择酝葬灶 孕悦砸反应体系包含：早阅晕粤或 荧光标记的栽葬择酝葬灶探针，经栽葬择酝葬灶 孕悦砸反应检测体 者员颐员园园稀释的孕悦砸产物 员 蕴，圆 伊栽葬择酝葬灶 哉灶蚤增藻则鄄 μ  细胞中的 耘郧云砸 基因突变。针对 员猿 种不同的 耘郧云砸 泽葬造 酝葬泽贼藻则 酝蚤曾 缘 蕴，圆园 伊 责则蚤皂藻则辕 责则燥遭藻 皂蚤曾 园郾缘 蕴， μ μ 基因突变设计探针，其中 员员种突变已经有文献报道。 凿凿匀 韵猿郾缘 蕴，总体积是员园 蕴。孕悦砸 反应条件设置 圆 μ μ 研究结果发现，栽葬择酝葬灶 孕悦砸 是一种很敏感、快速的 为：怨缘益，员园 皂蚤灶；怨缘益 员缘 泽；缘愿益 员 皂蚤灶循环猿园 次；用 耘郧云砸基因突变检测方法，可用于大规模的人群筛查。 粤月陨苑缘园园 砸藻葬造 栽蚤皂藻 孕悦砸 杂赠泽贼藻皂分析检测结果。 现报告如下。 员援缘摇 统计学方法摇 用 杂贼葬贼 灾蚤藻憎 缘郾园 统计软件，采用 员摇 资料与方法 云蚤泽澡藻则忆泽 耘曾葬糟贼检验，按双侧怨缘豫的置信水平。 员援员摇 样品来源以及早阅晕粤 的提取摇 收集圆园园愿年猿 月 圆摇 结果 至圆园员园 年愿 月的怨 例非小细胞肺癌标本，均来自武 圆援员摇 直接耘郧云砸基因测序结果摇 怨 例非小细胞肺癌 汉大学人民医院肿瘤中心，所