环境因素对微生物生长的影响.pptVIP

一、目的 二、基本原理 三、实训材料 四、实训内容和步骤 五、注意事项 六、结果与分析 七、思考题 1、菌种 大肠杆菌、金黄色葡萄球菌； 2、培养基 牛肉膏蛋白胨培养基； 3、其他物品 培养皿、无菌生理盐水、镊子、无菌滤纸片、无菌滴管、接种环、水浴锅、紫外线灯、消毒水等； 4、药敏试纸 土霉素、氯霉素、庆大霉素等； 1、氧气对微生物生长的影响 2、温度对微生物生长的影响 3、pH对微生物生长的影响 4、紫外线对微生物生长的影响 5、不同药物是杀菌试验 （1）取牛肉膏蛋白胨半固体培养基试管4个 （2）用穿刺接种法分别按种金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、每种菌种接种2支培养基试管。 （3）37℃恒温培养48h后观察结果，注意各菌在培养基中的生长部位。 （1）取6支装灭过菌的牛肉膏蛋白胨培养液试管，每管装5mL，分别标明20 ℃、37 ℃、45 ℃三种温度，每种温度2管。 （2）向每管接入培养18~20h的大肠杆菌菌液0.1mL，混匀。 （3）将上述各管分别按不同温度进行震荡培养24h观察结果，根据比浊法测定微生物数量的原理，菌液的比浊浓度越大，微生物越多，该温度就越适应微生物的生长，从而可以判断大肠杆菌和金黄色葡萄球菌生长繁殖的最适温度。 （4）以“—”表示不生长，“+”表示生长，并以“+”、“++”、“+++”表示不同生长量。记录结果。 （1）配制pH为3.0、7.0、9.0的牛肉膏蛋白胨液体培养基，做好记号，高压备用。 （2）将大肠杆菌和金黄色葡萄球菌按1﹪的量分别接种与（1）的肉汤中，每种接种两支。留1只做对照。 （3）将接种后培养基置37℃振荡培养24h观察结果。根据菌液的浑浊度判断大肠杆菌和金黄色葡萄球菌生长繁殖的最适pH值。 （4）以“—”表示不生长，“+”表示生长，并以“+”、“++”、“+++”表示不同生长量。记录结果。 （1）取牛肉膏蛋白胨培养基平板2个，分别标明大肠杆菌、金黄色葡萄球菌等试验菌的名称。 （2）分别用无菌移液管取培养18~20h的大肠杆菌和金黄色葡萄球菌菌液0.1mL加到相应的平板上，再用无菌涂棒涂布均匀，然后用无菌纸遮盖部分平板。 （3）紫外灯预热10~15min后，把盖有滤纸的平板置紫外灯下，打开培养皿，紫外线照射20min，取去纸，盖上皿盖。 （4）37℃培养24h后观察结果，比较并记录两种菌对紫外线的抵抗能力。 （1）取培养18~20h的大肠杆菌和金黄色葡萄球菌斜面各1支，分别加入4mL无菌生理盐水，用接冲环将菌苔轻轻刮下，振荡，制成均匀的菌悬液。 （2）取3个无菌培养皿，每个皿底写明菌名及测试药品名称。 （3）分别用无菌滴管加4滴菌液与相应的无菌培养皿中 （4）将融化并冷却至45~50℃的肉膏蛋白胨培养基倾入皿中约15ml，迅速与菌液混合，冷凝，制成含菌平板。 （5）用镊子取分别土霉素、氯霉素、庆大霉素等的药敏试纸片各一张，置于同一含菌平板。 （6）将平板倒置于37℃恒温箱中，培养24h后观察结果，测量并记录抑菌圈的直径，根据其直径的大小，可初步确定测试药品的抑菌效能。 1、试验过程中应注意无菌操作。 2、培养温度应根据需要调整。 3、正确标记各种试验用的培养基，防止培养物培养过程中和他人的混淆。 1、实验结果以绘图或表格的方式，报告各种因素对微生物的影响的结果 2、对各种实验结果进行分析讨论 1、紫外线照射时，为什么要除掉皿盖？ 2、化学药剂对微生物所形成的抑菌圈内未长菌部分能否说明微生物细胞已杀死。 移液管：1mL*2支*10=20材料 仪器 平板：50个/班 涂布器：10个/班 三角瓶：30个/班 试管：190支/班 5mL移液管：10个/班 1mL移液管：20个/班（每种菌各一支，但要做好标记） 镊子：10个/班 接种环/针：10个/班 滤纸：4盒 无菌生理盐水 酒精棉球：10瓶/班 3种药敏试纸 固体培养基：750mL/班 半固体培养基：200mL/班 液体培养基：750mL/班 （pH=7.0 450mL/班；pH=9.0 150mL/班；pH=3.0 150mL/班） O2：不用摆斜面 固体试管 试管：4支/组 4*10=40 接种环：1支/组 1*10=10 半固体培养基：5mL/支*4支*10=200mL 需要大肠杆菌斜面菌种：最少5支 金色葡萄球菌斜面菌种：最少5支 温度：液体试管 试管：6支/组 6*10=60 移液管：1mL*2支*10=20支/1mL 液体培养基：5mL*6支*10=300 mL 需要大肠杆菌菌液：最少5支 金黄色葡萄球菌菌液：最少5支 pH: 液体试管 三角瓶：3个*10=30个 试管：9支*10=90支 移液管：1mL*2支*10=20支/1m