蛋白质组学技术及其在临床检验诊断学中的应用.pdfVIP

医学检验与临床 　2008 年第 19 卷第 5 期 　Medical L aboratory Science and Clinics ,2 008 ,Vol 19 ,No . 5 　　　　　　 　 　·　1　·　 蛋 白 质 组 学 技 术 及 其 在 临 床 检 验 诊 断 学 中 的 应 用 伏建峰 (兰州军区乌鲁木齐总医院检验科 ,乌鲁木齐 830000) 　　人类基 因组计划 的完成加速了蛋白质组学的发 好 ,易获 得感 兴趣 的蛋 白。多维蛋 白质 识别 技术 ( ) 展 ,使之成为当今生命科学的热点之一 。疾病 的发 MudPIT 即多维液相色谱 - 串联质谱技术 ,其分离 生 ,往往伴随着蛋 白质数量 、结构和性质 的异常 ,蛋 系统 由一根离子交换柱和两根反相色谱柱组成 。液 白质组学技术的应用 ,为疾病的诊断提供 了新手段 。 态样品用多种蛋 白酶消化后 ,依次进入离子交换柱 临床捡验诊断学的根本 目的是将识别疾病并诊断和 和第一 、第二根反 向色谱柱分离 ,再与质谱仪联用 , 治疗的生物标识物 ,包括血液 、尿液 、脑脊液 (CSF) 、 达到对复杂 的肽混合物进行质谱分析鉴定的 目的 。 ( ) 乳头抽吸液 NAF 等各种体液都被用于研究与某些 与2 - DE 不 同 ,MudPIT 可同时消化几百种甚至几千 疾病 的关系 。采集有价值 的样本 ,应用合理 的蛋 白 种蛋 白,真正做到了高效 、高通量分析 ,并能识别和 质组学研究策略 ,进行蛋 白质分离、鉴定 ,有望发现 鉴定一些使用 2 - DE 难 以分离的蛋 白质 ,如低丰度 新 的有意义 的标志物 ,从而有助于疾病的早期诊断 。 蛋白、疏水膜蛋 白、分子量极小和极大蛋 白以及极碱 本文着重对蛋白质组学技术及其在临床检验诊断学 [2 ] 和极酸蛋 白 。 中的应用作一综述 。 ( ) 同位素标记亲和标签技术 ICAT 是采用同位素 标记多肽或蛋白质 的亲和标签技术 ,其灵敏度和准 1 　蛋白质组学研究的新技术 确度较高 ,能分析低表达 的蛋 白质 ,是 目前蛋白质组 1. 1 　分离 　Righetti 等[ 1] 报道了一种用 固相配体库 学研究的核心技术之一 。它的优点在于可以对混合 (solid - p hase ligand libraries) 缩小血浆蛋 白丰度动态 样品直接测试 ,能够快速定性和定量鉴定低丰度蛋 范围的样本处理方法 。该配体库 中的配体数 目众多 白质 ,尤其是膜蛋白等疏水性蛋白 ,还可以快速找出 ( (约 10 亿) ,理论上血浆中的每一个蛋白都能在库 中 具有重要功能的蛋 白质 疾病相关蛋 白及生物标志 找到其相应 的配体 ,并与之特异 的结合 。首先 , 固相 物[3 ] ) 。 ( ) 配体先与样品血清孵育 ,高丰度蛋 白很快就达到饱 液相芯片技术 liquichip 是新近开发 出的既能 和 ,未结合部分被洗掉 由于各种