显微镜的使用与维护_百替生物.pdfVIP

实验一、 显微镜的使用与维护 一、显微镜的组成(仿Olympus) 1. 机械部分 镜头转换器；粗、细准焦螺旋；载物台；刻度尺；镜臂；镜座 2. 光学部分 (1)放大系统 物镜(三个)；目镜；镜筒 放大倍数= 目镜倍数×物镜倍数 (2)集光系统 光栅；聚光镜；反光镜；开关 二、使用 1.开关：动作要轻、慢，不使用时要及时关闭。 2.调焦距：先用粗准焦螺旋，再用细准焦螺旋。 3.安指针：加拿大树胶、头发 4.观察：低倍镜®高倍镜 三、维护工作 1.擦镜头时，用双层镜头纸对折，从中间向周围擦，不能用滤纸或其它 物品代替镜头纸。每次实验完毕，镜身要用纱布擦干净。 清洗液 (1) 乙醚：无水乙醇=85:15(冬春季)或80:20(夏秋季) (2)二甲苯 2.载物台上的载玻片和盖玻片要清洁，切勿污染物镜或其它部件。 3.显微镜不可上锁，如不小心会损伤粗、细准焦螺旋。 4. 由低倍向高倍转换时，可稍微下降载物台，以免损伤显微镜。 5.存放时，将载物台降到最低点，并把镜头移开。 所需材料及药品 接线板、乙醚:无水乙醇=80:20、牙签、加拿大树胶、镜头纸 第一大实验 细胞学实验 实验一、细胞固定、染色原理与方法 一、固定与固定液 (一)固定：将新鲜的活组织从生物体取下后，立即投入固定剂中，借助化学药品的作用，使细胞保持原有形 态、结构的一种手段。 service@100 1.目的 (1)迅速防止细胞死亡后的变化,防止自溶、腐败，尽量保持生长状态结构。 (2)使细胞中的蛋白质、脂肪、糖、酶等成分转变为不溶性物质，以保持生前的形态。 (3)使组织内各种物质成分产生不同的折光率，便于观察和鉴定。 (4)使不同组织成分对染料有不同的亲和力，便于染色。 (5)防止细胞过度收缩或膨胀，失去原有的形态结构。 2.时期 (1)有丝分裂：有丝分裂主要发生在根尖、茎生长点及幼叶等部位的分生组织，根尖取材容易，操作和鉴定方 便。 (2)减数分裂：选取适当大小的花蕾是观察花粉母细胞减数分裂的关键性的第一步。此时的植株形态及花蕾大 小依植物的类别及品种有所不同。 小麦：在植株开始挑旗，旗叶与下一叶的叶耳间距为3-4cm，花药长度大致在1-2mm 左右，黄绿色时取材最 好。如花药为绿色时则为时过早，花药为黄色，则已过时。一般上午8-10 点为取材最佳时间。 玉米：一般夏玉米在7 月份取材，以上午7-8 点为好。在玉米雌穗未抽出前的7-10 天手摸植株上部(喇叭口下 部)有松软感觉，表明雄花序即将抽出。用刀在顶叶近喇叭口处纵向划一刀，切口长10-15cm，剥出雄花序，顶端 花药长3-5mm，花药尚未变黄时取材。 蚕豆：从现蕾开始，上午10-11 点可选取2-3mm 大小的花蕾或一小段花序。蚕豆开花的次序是由下而上，由 外而内。 3.固定时的注意事项 (1)固定液量：20 倍于材料的体积，以免固定液被稀释。 (2)选择合适的固定液：渗透力强的固定液既可以迅速进入组织中，又不使组织过度收缩或膨胀。 (3)固定的时间要合适： 与材料的大小和温度有关：材料大则时间长，材料小则时间短；温度高则时间短，温度低则时间长。 经固定的材料如不及时使用，可以经过90%酒精换到70%酒精中各半小时，再换入一次70%酒精，在0-4℃ 冰箱内可保存半年。经过较长时间保存的材料进行观察前可以换新的固定液再处理一次，效果较好。 (二)固定液 固定液包括简单固定液和混合固定液两种。简单固定液就是用一种药品作为固定液，如乙醇、 甲醛、冰醋酸、升汞等。简单固定液只对细胞的某种成分固定效果较好，而不能将所有的成分都保存下来。混合 固定液是指两种或两种以上的化学物质的混合液，如卡诺氏固定液等。 1.固定液的条件 (1)迅速渗入组织,杀死原生质。在杀死的短时期中,细胞形态不致有所变化。 (2)必须具有渗透力，对组织各部分的渗透力相等，可使组织内外完全固定。 (3)尽可能避免使组织膨胀或收缩。 (4)使细胞内的成分凝固或沉淀。 (5)增加细胞内含物的折光程度，易于鉴别。 (6)增加媒染作用和染色能力。 (7)使组织变硬，具