基于磁纳米粒子修饰的SPR传感器.pdfVIP

第 37卷 分析化学 (FENXIHUAXUE) 增刊 2009年 1O月 ChineseJournalofAnalyfic~Chemistry F049 基于磁纳米粒子修饰的SPR传感器 孙 颖 毕 宁 王丽英 王 健 朱晓楠 姜春竹 吴丽威 张寒琦 宋大干 (吉林大学化学学院，长春 130012) 磁纳米粒子是 20世纪 70年代后逐步产生并发展起来的一种应用前景广阔的新型磁性材料， 由于其具有 良好的磁响应性、粒径小、比表面积大、生物相容性好等优点而广泛地应用于生物技 术领域 】【吲。采用磁粒子固定抗体的免疫检测与传统的在传感膜上固定抗体的方法相比，不需要金 膜和抗体之间的共价连接，因此它极大地简化 了抗体的固定，加速 了待测物的检测。同时采用层 层 自组装技术，在金膜的表面交替 自组装聚电解质阴阳离子，形成聚电解质膜，不‘仅对金膜起到 了保护的作用，避免了磁纳米粒子与金膜的直接接触，还在一定程度上提高了传感器的灵敏度。 巯基丙酸 (MPA)，聚烯丙基胺盐酸盐 (PAH，分子量为 70000)，聚苯乙烯磺酸盐 (PSS，分 子量为 70000)，FeCl36·H2O (99％)和 FeC124H2O (99％)均购于 Sigma公司；葡聚糖 (Dextran T40，分子量为 40000)购于 Pharmacia公司；热休克蛋 白 (Hsp70)和兔抗 Hsp70购于上海生物 制品所。其它化学药品均为分析纯。 首先，分别将不同层数的聚电解质膜 (PAH／PSS) 在棱镜的金膜上进行 自组装。之后，将棱 镜固定在 SPR传感器系统中，待 SPR信号稳定后，向流通池中注入磁粒子兔抗Hsp70偶联体， 将磁铁置于棱镜上方。在磁场中，通过磁力作用将磁粒子抗体偶联体吸附在金膜表面。随后依次 注入 PBS缓冲液配制的一系列不同浓度 的Hsp70溶液，实时记录共振波长随时间的位移情况。 检测完毕后，将磁铁取下，抗体偶联体被洗脱下来，传感器可重复使用 。该电解质 自组装多层膜 是依靠静 电吸附作用而形成的。在金膜表面每吸附一层 电解质都会引起 SPR光谱发生红移。形成 聚电解质膜 (PAH／PSS)1、(PAH／PSS)2和 (PAH／PSS)3所引起的共振波长的变化分别是 l5．45，33．61 和 52．81nlll。同时，对修饰了三层聚电解质膜(PAH／PSS)的金膜进行了原子力显微镜分析，聚电 解质膜(PAH／PSS)3的平均厚度在 9．61am 左右 ，说明金膜可 以完全被聚电解质膜所覆盖， (PAH／PSS)3膜的存在避免磁粒子抗体偶联体与金膜表面直接接触。 当聚电解质膜 (PAH／PSS)1自组装到金膜上后，SPR传感器所能检测到 Hsp70的浓度范围是 2．00-20．00mg／L；当聚电解质膜 (PAH／PSS)2自组装到金膜上后，此时 SPR 传感器所能检测到 Hsp70的浓度范围是 1．50～20．00mg／L；当聚电解质膜 (PAI-I／PSS)3自组装到金膜上后，此时SPR 传感器所能检测到 Hsp70的浓度范围是 0．5-20．00mg／L。随着聚电解质膜层数 的增加 ，所测得 Hsp70的最低浓度逐渐降低 。应用聚电解质膜 0AH／eSS)所测得Hsp70的最低浓度 (0．5mg／L) 比应用聚电解质膜 (PAH／eSS)l所测得Hsp70的最低浓度 (2．00mg／L)低4倍。 References 1 thenCLChenYC．AnalChem．，2005，77：5912-5919 2 TanC T0ngYW AnalChem．，2007，79：299-306 3 ChenS YenYH’WangCL，etd．EnzymeMicrob．Technol，2003，33：643--649 本文系国家 自然科学基金(No，吉林省科技发展计划项目 (No项 目资助 E—mail：songdq@jlu．edu．on；TelF／ax：+864318·5168399；+86431