08核移植技术与动物克隆HXY.pptVIP

　　第二，多利是世界上首例利用成年哺乳动物体细胞作为供体细胞繁殖的克隆羊，即成体母羊的复制品。它的成功提示我们可以进一步做到，在培育体细胞成为核供体之前，利用“基因靶”技术精确地诱发核基因的遗传改变或精确地植入目的基因，再用选择技术准确地挑选那些产生了令人满意变化的细胞作为核供体，从而生产出基因克隆体。也就是说，我们可以按照人的意志去改选、生产物种。 * 　　第三，在现代生物学领域中，沿有任何一项研究成果能够比通过对基因进行有规律地控制而解决更多的问题的先例。多利羊的诞生及生长表明，利用克隆技术复制哺乳类动物的最后技术障碍已被突破，在理论上已成为可能。 * 目前已经克隆出的动物 三、 核移植技术的应用 1．制备转基因克隆动物，?进行生物药物生产； 2．培育优良畜种，扩大良种种群 ； 3．开展异种动物克隆，拯救濒危动物； 4．与干细胞技术结合，开展治疗性克隆 5．利用核移植技术，研究生物学的基本问题 。 * 生殖性克隆 * 治 疗 性 克 隆 细胞治疗 组织替代 器官移植 * 培 育 各 种 疾 病 动 物 模 型 应用核移植技术可以培育基因完全一致的实验动物模型 ，为遗传学，病理学研究提供良好的实验材料。 动物种类 疾病模型数 猪 65 猫 123 狗 203 * 四、克隆技术存在的问题 　理论问题 分化的体细胞克隆对遗传物质重编（细胞核内所有或大部分基因关闭，细胞重新恢复全能性的过程）的机理还不清楚； 克隆动物是否会记住供体细胞的年龄。 克隆动物的连续后代是否会累积突变基因。 在克隆过程中胞质线粒体所起的遗传作用等问题还没有解决。 * 　实践问题 克隆动物的成功率还很低 生出的部分个体表现出生理或免疫缺限。 即使是正常发育的“多莉”，也被发现有早衰迹象 * 除了以上的理论和技术障碍外，克隆技术（尤其是在人胚胎方面的应用）对伦理道德的冲击和公众对此的强烈反应也限制了克隆技术的应用。 * CCTV关于克隆人的一个科普节目： /show/R809f49u91CnMitn.html /refer/JfQBmpZ5jFOljNdC/v.swf * 3. 哺乳类的细胞核移植 1977年，美国缅因州巴尔港的杰克逊实验室用“亚无性繁殖”的方式，培育出7只单亲小鼠。 * 将卵细胞受精，在精、卵核融合之前，把精核去掉，然后放入加有适量细胞松驰B的溶液中。 经此番处理的卵细胞的染色体复制后出现了两个核，将此双核细胞放入正常培养液中培养。 卵中的双核细胞自动融合，并且细胞开始分裂。 将此种胚胎移入母鼠子宫培育。 生产出7只单亲小鼠。 * 1981年，瑞士日内瓦大学和美国杰克逊实验室合作，首次对小鼠卵进行移核试验获得成功。他们将囊胚内细胞团细胞的核移入去核的受精卵中，经培养移核卵发育至囊胚期，再将此胚胎移入同步孕鼠子宫内，最后产下两雌一雄仔鼠，并发育成了可育的个体。 * * 二 、核移植技术的一般操作程序 核移植克隆哺乳动物的技术操作过程主要包括核受体和核供体的处理和制备、核移植、重组胚的体外或体内培养、核移植胚胎移入代孕母畜（寄母）等步骤 。 * 1．核受体细胞的准备 受体细胞的种类：卵母细胞、受精卵、2-细胞胚胎。 其中卵母细胞最为普遍。这是因为在卵母细胞的细胞质含有某种特定的因子，可以使移植核中所含有的基因表达程序发生重新排列，使已经分化了的细胞重新回到发育过程的原点，同受精卵一样开始个体发育过程。 卵母细胞的来源有两种方式：一是用激素对雌体进行超排处理，从输卵管冲出体内成熟的MⅡ卵母细胞。二是从屠宰场收集卵巢，吸出滤泡中的卵丘—卵母细胞复合体，在体外培养成熟后作为受体。 * 如何给受体细胞去核？ ◆ 显微操作 ◆ 细胞松弛素结合高速离心 ◆ 紫外照射 * 2．核供体细胞的准备 细胞核供体细胞首先必须是完整的二倍体，该细胞必须保持有供体动物完整的基因组； 其次，供体细胞核必须能够在受体细胞质的作用下，产生细胞分化过程的倒转，变得如同刚刚受精的合子一样，能重新完成从受精到发育成一个正常动物个体的全过程。 供体细胞主要有两大类：胚胎卵裂球和体细胞。另外，核供体细胞的来源还有胚胎干细胞和胎儿成纤维细胞。 * 如何获取供体细胞核？ ◆ 显微操作 ◆ 细胞松弛素结合高速