关于奎诺酮酶联免疫检测试剂盒的使用(组织生乳全蛋).docVIP

喹诺酮类酶联免疫检测试剂盒说明书【反应原理】 喹诺酮类（QNS）酶联免疫检测试剂盒，主要是利用抗原与抗体的特异性免疫化学反应的基本原理来进行的，换句话说，就是利用酶标记物与样品中的喹诺酮与微孔中的抗体进行竞争反应。在整个反应当中，如果样品中的喹诺酮残留的越多，相对地就会竞争反应越多的酶标记物，使得能结合上抗体的酶标记物相对地减少，用TMB底物显色，样品中的喹诺酮含量与样品的吸光度值呈反比，与标准曲线比较即可得出喹诺酮含量。 【】 1 2、喹诺酮标准溶液(1.5 mL / 瓶)：0 ppb、0.3 ppb、1.1 ppb、3.3 ppb、10 ppb、30 ppb; 100ppb 3、10倍浓缩萃取稀释液/清洗液 …………………… 50 mL 4、200倍喹诺酮酶结合物………………………… 0.1 mL 5、显色液 ………………………………………………12 mL 6、反应终止液 …………………………………………13 mL 【】 ppb 鱼肉……………………………………………… 0.45 ppb 鸡肉 ………………………………………………0.45 ppb 虾 ………………………………………………0.45 ppb 猪肉……………………………………………… 0.45 ppb 全蛋……………………………………………… 2 ppb 交叉反应率： 恩诺沙星……………………………………………100% 环丙沙星……………………………………………102% 培氟沙星……………………………………………85% 诺氟沙星……………………………………………70% 单诺沙星……………………………………………65% 氧氟沙星……………………………………………60% 恶喹酸 ……………………………………………55% 氟甲喹 ……………………………………………50% 加替沙星……………………………………………47% 洛美沙星 …………………………………………31% 依诺沙星 …………………………………………25% 氟罗沙星 …………………………………………15% 左氧氟沙星…………………………………………9% 色拉沙星 …………………………………………4% 萘啶酸………………………………………………6% 回收率： 生乳………………………………………70~130% 鱼肉………………………………………70~130% 鸡肉………………………………………70~130% 虾…………………………………………70~130% 猪肉………………………………………70~130% 养殖水……………………………………70~130% 全蛋………………………………………70~130% 批间、批内变异系数：CV≤10% 【】(单道20μl-200μl、100μl-1000μl、多道250μl) 所需试剂： 1、分析级甲醇： 80%甲醇: 100%甲醇 80ml + 1×萃取稀释液20ml 70%甲醇: 100%甲醇 70ml + 1×萃取稀释液30ml 60%甲醇: 100%甲醇 60ml + 1×萃取稀释液40ml 55%甲醇: 100%甲醇 55ml + 1×萃取稀释液45ml 25%甲醇: 100%甲醇 25ml + 1×萃取稀释液75ml 8%甲醇: 100%甲醇 2ml + 1×萃取稀释液23ml 4%甲醇: 100%甲醇 1ml + 1×萃取稀释液24ml 2、正己烷 3.分析级乙醇(Analyzed Ethanol) 35%乙醇: 100%乙醇 35ml + 1x提取液65ml 【 1、待测物为生乳，则依以下方法进行处理 取1 ml之待测生乳以离心机离心20分钟 (3500 rpm) ，吸取中间液体层200uL，并加入35%乙醇800uL稀释5倍。 检品敏感度：2 ppb 稀释倍数：5 2、待测物为鸡肉或猪肉或鱼类样品，分别依感度需求以下列方法择一进行： 方法一： 1.将2g已均质样品放入15 mL离心管中，再加入4mL 25%甲醇及1N NaOH 50uL，震荡混合约1分钟，以60℃隔水加热约10分钟，再以上下转动充分混合约10分钟。 2.以离心机离心15分钟 (3500 rpm) ，再吸取上层液中的底部以1×萃取稀释液再稀释1.5倍 （即上层液200 μL加1×萃取稀释液100 μL）。 检品敏感度：1.5ppb 稀释倍数：4.5 方法二： 1.将1g已均质样品放入15 mL离心管中，再加入3 mL 80%甲醇，震荡混合约1分钟，再以上下转动充分混合约10分钟。 2.以离心机离心15分钟（3000 rpm），取1 mL上层液（8