耐药白念珠菌CYP51酶活性的研究.pdfVIP

3．2双嘧达莫制剂 双嘧达莫为心血管系统用药，近年来报道有广谱抗病毒作用，能抑制所有小RNA病毒、正黏液病毒及 某些DNA病毒，局部给药治疗皮肤病毒感染，可避免口服给药引起的头痛、眩晕、恶心、呕吐、腹泻等不良反 应，还能扩张血管易于透皮吸收，具有促进水疱内容物吸收的作用。用双嘧达莫乳膏治疗带状疱疹280例， 每日2次涂于患处，2d后，症状明显减轻，疱疹颜色变暗、变干、变平，3d后，完全干燥结痂，有效率100％。 3．3穿心莲制剂 穿心莲的有效成分穿心莲内酯有明显的解热、抗炎作用。舒可成等以脱水穿心莲内酯琥珀酸半酯单钾 盐为主药，以聚乙烯吡咯烷酮为成膜材料，并加入丁卡因、氮酮、丙二醇等，制成复方疱疹净涂膜剂，治疗带状 疱疹该制剂在2min内成膜，且不易脱落，不污染衣物，使用方便。 另外磺胺嘧啶霜、高锰酸钾溶液、利福平涂剂等均有治疗带状疱疹的报道。有些具有清热解毒、散结祛 瘀作用的中成药外用治疗带状疱疹，也可取得满意疗效，且有使用方便的特点，如六神丸、牛黄解毒丸、紫金 锭、冰黛散、云南白药、南通蛇药、双黄连等。临床上可在常规治疗的基础上，适当选择一些外用药进行辅助 治疗。(参考文献略) 耐药白念珠菌CYP51酶活性研究。 刘洪涛1，晏秀伟1，姜远英2(1军事医学科学院附属医院，北京100039 2第二军医大学药学院药理教研室) 近十年来，真菌感染在免疫受损的病人群体中发病率猛增，特别引人注意的是80％以上艾滋病病人受 真菌感染，尤其是白念珠菌比较常见，深部真菌感染已成为许多疾病的主要死亡原因之一。羊毛甾醇14a一 去甲基化酶(CYP51)是真菌细胞膜必需成分——麦角甾醇生物合成过程中的一个关键酶。氟康唑、伊曲康 唑、酮康唑等目前临床最常用的唑类抗真菌药物都是通过抑制这个靶酶来发挥抗真菌作用的。研究发现 CYP51的结构变异能导致真菌耐药陛的产生，因此研究CYP51的结构和功能关系是指导真菌耐药机制研 究和抗真菌药研发的有效途径之一。本文利用体外氟康唑诱导获得了耐药白念珠菌，并测定了氟康唑对几 侏白念珠菌的最小抑菌浓度(MICso)，包括敏感菌株和临床耐药株、实验室耐药株，并检测了其对不同药物 的交叉耐药性。利用该实验室诱导的耐药白念珠菌，研究其CYP51酶活性，并与亲本敏感株相比较。 l材料和方法 1．1仪器与试剂 一[2一“C]甲羟戊酸内酯甲苯溶液(Amersham)：50正·mlo；闪烁液(Packard)。 1．2实验用菌株 1．3耐药白念珠菌MICso的测定 采用微量液基稀释法测定氟康唑对实验白念珠菌的MICs。值。同时测定酮康唑、伊曲康唑和特比萘芬 对上述白念珠菌的MIC80值。 1．4[1一“C]乙酸掺入实验 分别取白念珠菌标准株和耐药株，经YEPD活化，取2r11l接种至200mlYEPD，30℃，200r振荡培养16 h，2000r离心10 -本文为国家自然科学基金，上海市科技发展基金(98QBl4009)资助项目 1123 h，加新鲜配制的皂化剂2ml，加盖，80℃水浴皂化 后，各加[1一“c]醋酸钠lp．Ci，加盖，30℃，250r振荡培养3 1 nⅡn宽的条带上，各样品间间隔6mm，薄层色谱条件为展开剂：环已烷：乙酸乙酯(4：1)，展开8crfl。薄层板 于碘蒸气中显色定位，挥尽碘后将各对应斑点处硅胶刮下，置闪烁瓶中，加闪烁液0．5ml，进行液体闪烁计 数，测定各样品的cpm值。 1．5离细胞酶[2一“C]甲羟戊酸掺入实验 ml 分别取白念珠菌敏感和耐药株，经YEPD两次活化，取31T11接种至300 16 h，2000r离心10 菌30 sec，重复4次，每次间隔30see。破碎的菌液15000 1． 上清即为离细胞酶液。用考马氏亮蓝法测定其蛋白质含量，加PBS调整浓度至蛋白质含量为10mg·ml 1／lmol；NADP 1tlmol；NADPH