加强抗中性粒细胞胞浆抗体检测方法的规范化及合理应用.docVIP

加强抗中性粒细胞胞浆抗体检测方法的规范化及合理应用 　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　赵明辉　章友康　王海燕　　抗中性粒细胞胞浆抗体(ANCA)是近10年来发展起来的，用于诊断原发性小血管炎的极为重要的血清学诊断工具。与ANCA相关的小血管炎主要指韦格纳肉芽肿(WG)、显微镜下型多血管炎(MPA)及原发性局灶节段坏死性肾小球肾炎(FSNGN)［1］。最早的ANCA检测方法为间接免疫荧光法(IIF)，应用酒精固定的中性粒细胞可产生两种荧光形态：即胞浆型(cANCA)和环核型(pANCA)。以后又有酶联免疫吸附法(ELISA)，根据应用的抗原的不同又分为总抗原ELISA和抗原特异性ELISA，蛋白酶3(PR3)和髓过氧化物酶(MPO)是两个最为重要的ANCA特异性抗原。近10年来国外在ANCA的方法学上做了许多探讨和尝试，已经基本上形成了较为规范化的检测方法和检测程序［2～4］。国内自90年代初开始检测ANCA［5］，但方法学上较为混乱，并无统一标准，影响了ANCA的推广及应用，甚至导致临床的误诊。我们将结合自己的点滴体会重点介绍国际上形成共识的ANCA检测方法及应注意的问题。　　一、IIF法　　目前仍为最常用的方法。应注意如下几个问题。　　1.根据1988年哥本哈根第一届ANCA国际研讨会所制定的方法，应选用正常健康人肝素抗凝血分离全体