4 细菌的遗传与变异.ppt

2.在诊断于治疗中的应用 诊断：与形态结构、染色性、 生化、抗原 性等变异有关 治疗：与耐药性变异有关 预防：与毒力变异有关 诊断困难 H→O变异：如伤寒沙门菌鞭毛 S→R变异：消失荚膜或多糖 抗原性改变 毒力下降，生化反应改变 治疗困难：耐药 3.在预防中的应用 减毒活疫苗有较好的预防效果。 减毒活菌苗可以从自然界分离获得，也可用人工方法选择改变毒力的变异株。 目前应用的减毒活菌苗如卡介苗（BCG）是十分成功的例子。 Ames试验： 4.检查致癌物质的作用 正常细胞发生遗传信息的改变可致肿瘤。因此导致突变的条件因素均被认为是可疑的致癌因素。目前已被采用的Ames试验是以细菌作为诱变对象，以待测的化学因子作为诱变剂，将待测的化学物质作用于鼠伤寒沙门氏杆菌的组氨酸营养缺陷型细菌后，将此菌接种于无组氨酸的培养基中。如果该化学物质有促变作用，则有少数细菌可回复突变而获得在无组氨酸培养基上生长的能力。这种以该菌株的回复突变作为检测致癌因子指标的方法比较简便，可供参考。 5.在遗传工程方面的应用 遗传工程（基因工程）的目的是人工对所需的目的基因进行分离剪裁，然后将目的基因与载体结合后，导入宿主细胞或细菌进行扩增获得大量的目的基因，或通过宿主表达获得所需的基因产物。 目前基因工程已广泛应用于生产实践中（工业、农业、医药等方面） 基因工程的主要操作步骤： 分离目的基因（供体） 通过基因载体 导入其他生物细胞（受体） 与其染色体发生基因重组 在选择培养基上培养（筛选） 重组生物细胞 可表达目的基因的性状 基因工程 载体：质粒，噬菌体 工程菌和酶：限制性内切酶，连接酶 选择目的基因，细菌中表达，如胰岛素、白介素、干扰素等 基因工程疫苗 质粒与噬菌体都是较理想的基因载体。通过这些载体的利用，重组基因中的目的基因可被转入宿主细菌进行基因产物的表达，从而获得用一般方法难以获得的产品，如胰鸟素、生长激素、干扰素等。 遗传工程技术还可应用于生产具有抗原性的无毒性的疫苗，这是预防传染病的一种新的途径。 小结 细菌遗传、变异的概念、变异类型 细菌遗传变异的物质基础 核内DNA 核外DNA 质粒的共性 遗传型变异发生的机制 （基因的转移与重组的方式） 细菌的变异现象及其在实际中意义 结果 如果是因接触噬菌体而诱导产生的，两套平板上出现的耐噬菌体菌株菌落数应大体相等。 如果不是因接触噬菌体而诱导产生的，系细菌自发突变则两套平板上的耐噬菌体菌落数应有显著不同。 因为在后一情况下，细菌分别在各支试管中的生长繁殖周期或早或迟可发生突变。突变发生早的突变株繁殖后出现的子代数必然多于突变株发生晚者，因此各平板上的菌落有的很多，有的则缺如。 实验结果证明两套平板上耐噬菌体菌落数差异很大（0～103个；3～7个），从而证实细菌的突变为自发的，而外界条件仅起选择作用。 涂布试验 1949年纽康布（Newcombe）设计的 其原理类似于变量试验 试验细菌为对噬菌体T1敏感的大肠杆菌 特点是方法更简便、实用 方法与步骤 将等量的大肠杆菌（5×104）涂布于12块琼脂平板上 37℃培养5小时（微小菌落）分成两组 喷上相应噬菌体T1 A组 B组 （直接） （重新涂布后） 放37℃培养24小时后观察菌落数 结果 计算两组平板上的抗噬菌体菌落数 结果发现： B组平板比A组平板上的抗噬菌体菌落数多的多（358：28） 结果说明：抗性突变发生在接触噬菌体之前，突变是随机地自然发生，加入噬菌体只是起选择作用，而不是诱导作用。 影印培养法(Replica plating) 1952年Lederberg设计了影印培养法(Replica plating) 这一试验证明细菌耐药突变不是由抗菌药物诱导产生的，而在未接触抗菌药物前已产生耐药突变。 菌株采用对链霉素敏感的大肠杆菌。 方法 将对链霉素敏感的大肠杆菌接种于营养琼脂平板上，培养后细菌在培养基上均匀的长出菌苔层