6种酶联免疫试剂盒在饲料呕吐毒素检测中的准确性评价.pdfVIP

2015年第翻卷第6鞠 ScienceandPractice 稿技与襄醚 6种酶联免疫试剂盒在饲料呕吐毒素 检测中的准确性评价 余 容 1．2，杨发树 ，杜雪莉 ，刘星苗 ，刘耀敏 ·，颜其贵 ， (1．通威股份有限公司检测 中心，四川成都 610041；2．四川农业大学动物医学院，四川雅安 625014； 3．四川农业大学动物疫病与人类健康四川省重点实验室，四川雅安 625014) 摘 要 ：为评估市售各品牌霉菌毒素酶联免疫检测试剂盒在饲料及其原料呕吐毒素检测 中的准确性 ，特选购市 售 6种品牌试剂盒进行验证 ，并选定其 中一种试剂盒与高效液相色谱法检测结果进行比较。试验结果表 明，市售 6种品牌试剂盒检测结果存在极大差异；与高效液相 色谱 法相 比，试剂盒检测结果偏高 ，且相对平均偏差最高为 48．4％。因此 ，选择市售酶联免疫试剂盒进行呕吐毒素含量检测使用前，有必要进行准确性验证 ，以保证检测结果 的准确性 ，降低饲料安全评估风险，且 ELISA检测结果显示为阳性的样品，需结合高效液相色谱法进一步确认， 以防误判 。 关键词 ：酶联免疫；呕吐毒素 ；试剂盒；高效液相色谱 中图分类号：$816：Q5o3 文献标识码 ：A 呕吐毒素(DON)，又名脱氧雪腐镰刀菌烯醇，是 谱法虽可做出精确定性定量测定，但是样品前处理 一 种单端孢霉烯族毒素 ，主要 由禾谷镰刀菌 、尖孢 要求严格 ，且仪器昂贵 ，检测通量小 ，测试人员往往 镰刀菌、串珠镰刀菌和雪腐镰刀菌等产生 ，广泛存在 还要进行专门的培训 ，因此成本较高，仅适合大型企 于各类农产品、食品及动物饲料 中，尤 以小麦、玉米 业或对检测灵敏度要求较高的科研院校、检测机构 及其副产物为主 ，给人类和家畜健康带来了巨大威 等单位使用 ，不能满足饲料行业的毒素检测需求。 胁 ，已引起世界各 国的关注和重视。目前 ，至少有 因此 ，简单 、快速 、灵敏 、低成本及适合大批量样品 100个国家 已经对粮食和饲料中呕吐毒素的限量进 筛选 的酶联免疫检测方法 (ELISA)越来越受到关 行 了强制性规定6【j。 注 9]。目前 ，市售的酶联免疫试剂盒多达十几种 ，但 目前 ，呕吐毒素检测方法主要为高效液相色谱 每种试剂盒 的技术要求不 同、质量参差不齐 ，前处理 法 、薄层色谱法 、酶联免疫法等l7I，其 中高效液相色 方式也不尽相同。不 同品牌试剂盒检测结果是否可 信 ，将是选用试剂盒进行呕吐毒素检测首要面临的 基金项 目：教育部长江学者和创新团队发展计划项 目(IRT0848) 问题。本文对市售的6种品牌酶联免疫试剂盒对其 作者简介：余容 (1982一)，女，四川简阳人 ，博士研究生 ，研究方 在饲料及其原料呕吐毒素检测 中准确性进行评估 ， 向为动物传染病病原微生物研究 ，Email：sher@tongwei．eOITl 并利用仲裁法推荐的高效液相色谱法 ，对其 中线性 通讯作者：颜其贵 (1967一)，男 ，重庆梁平人 ，教授 ，博导 ，主要 从事动物传染病病原分子生物学研究 ，Email：yanqigui@126．eom 较好 、检测结果相对标准偏差较小 的试剂盒 的准确 中围鸯牧京是IIi 斛技与蔡 Scienceand actice 性进行验证，同时对酶联免疫法与液相色谱法进行 相色谱柱 (4．6IlllnX150mm，5 m)，流动相为 10％乙 比较，以期为呕吐毒素酶联免疫检测试剂盒的选择 腈一水 (体积 比10：90)，柱温 30℃，流速 1．0mL／min， 及呕吐毒