以Ypt1基因序列为靶标的辣椒疫病菌快速分子检测.pdfVIP

植物病理学报 ACTAPHYTOPATHOLOGICAS1NICA 44(5)-546—551(2014) doi：10．13926／j．cnki．apps．2014．05．014 以 “基因序列为靶标的辣椒疫病菌快速分子检测 李毛毛 ，赵 伟 ，汪 涛。，谷 雨 ，高智谋 ，戚仁德 (安徽农业大学植物保护学院，合肥230036；安徽省农业科学院植物保护与农产品质量安全研究所，合肥230031) RapidmoleculardetectionofPhytophthoracapsicibasedonitsYpu gene LIMao． mao ，ZHAO W ei，W ANG Tao。 GUYu ，GAOZhi—mou ，QIRen—de (SchoolofPlantProtection，Anhui ， AgriculturalUniversity，Hefei230036，China；。InstituteofPlantProtectionnadAgro—productsSafety，AnhuiAcademyofAgri- culturalSciences，Hefei230031，China) Abstract：PCRprimersweredesignedbasedonthesequenceofRas-relatedproteingene( t1)ofP．capsici． Accordingtothemultiplesequencealignment，rptlhasthesufficientlypolymorphicintronregionforhte developmentofP．capsici—specificprimers(PcYptlF／PcYptlR)．Oneprimerpairwasdevelopde whichcan amplifyoneP．capsici—specificrfagmentof156bp．Usingtheprimerpair．theP．capsiciinfectedplnatsnadsoils weredetected．Additionally，rptlhasanappropriateregionofrhtedevelopmentofP tophthoragenus-spe cific primers(YptlF／YptlR)，whichcanamplifyafragmentofabout540bpfrom14different tophthoraspecices nadarfagmentofabout350bp in Pythium species，with no ma plification rfom fungalspe cies．By PCR optimization usingP．capsicigenomicDNA，htedetectionsensitivitiesof10Pgnad10fgDNA wereachievedin stnadardPCR (PcYptlWPcYptlR)andnestedPCR (YptlF／YptlRnadPcYptlWPcYptlR)，respectively．The developedprimerswereprovedtobeefficientindetectionofP tophthorapathogensfrom diseasedplnattissues nadresiduesinsoils． Keywords：P tophthoracapsici；moleculra detection；Yptlgene 文章编号：0412．0914(2014)05—0546—06 辣椒疫霉 (Phytophthoracapsici)是一种重要 定。聚合酶链式反应 (PCR)通过寻找合适的靶标 的植物病原卵菌。寄主范围广泛，除了辣椒以外，还 基因实现病菌的快速灵敏的分子检测，使用最多的 可以侵染番茄、茄子及多种瓜类，造成疫病，危害作 是核糖体转录间隔区域(ITS)序列。ITS序列具有 物生产。随着设施农业的大规模发展，蔬菜种植面 种间变异较大、种 内保守的特性，适合对不同物种 积Et益扩大．该菌所致病害及造成的经济损失逐年 进行区分[1]。但是一些分类地