中国梨木虱分泌物中氨基酸的分离与分析.pdfVIP

经验交流 中国梨木虱分泌物中氨基酸的分离与分析* 刘敬兰 周鸿娟 周清泽 李大乱 张翠疃 徐国良 河（北师范大学实验中心 石家庄 050016） 河（北省农林科学院石家庄果树研究所 石家庄 050061） 提 要 利用离子交换色谱法分离了中国梨木虱分泌物中的氨基酸；利用毛细管气相色谱法对梨木虱分泌物 中氨基酸的三氟乙酰丁酯衍生物进行了分析。用标准样对照定性，内标法定量。分泌物中共检出13种氨基酸。 关健词 毛细管气相色谱法，中国梨木虱，分泌物，氨基酸 分类号 O658 1 前言 吹40mL/min,分流比50:1。 中国梨木虱(PsyllaChinesisYangetLi)是危 2.3 实验步骤 害梨园的害虫，其分泌的黏液往往滴落到叶和果上， 2.3.1梨木虱分泌物中氨基酸的柱色谱分离 使叶腐蚀、霉变，早期脱落，果实被污染，影响果树生 将苯乙烯型强酸性阳离子交换树脂用 1mol/L 长。中国梨木虱喜欢隐藏在其分泌物内1。目前生产 盐酸洗至酸性，用蒸馏水洗去过量的盐酸至无Cl-, 上应用的绝大多数农药 包（括复配农药）不能破除梨 湿法装柱 1（6cm 2.5cm）。称取分泌液2.2379g, 木虱分泌物将其杀死，因此对梨木虱的防治效果不 用少量水溶解后，加入Pb(Ac)2溶液以沉淀蛋白，离 理想。研究分泌物的性质、组成及其破除方法，已成 心5min除（去固体物质）。取溶液部分进离子交换树 为解决梨木虱防治问题的重要部分。迄今为止，有关 脂柱。先用蒸馏水洗脱样品中的糖，并用Molish反 梨木虱分泌物的性质、组成的分析，国内外还未见有 应检验，洗脱至不再出现紫色环。再用1mol/L的氨 水洗脱氨基酸，并不断用茚三酮溶液检验，洗脱至无 文献报道。本文利用离子交换色谱法分离了梨木虱 蓝色反应产生为止。淋洗得到的氨基酸溶液在60 分泌物中的氨基酸，利用毛细管气相色谱法分析和 测定了氨基酸的三氟乙酰丁酯衍生物。通过与标准 水浴中减压浓缩至干，得到氨基酸粗品01728g, 占梨木虱分泌液质量的7.35％ァ。 样对照来定性，用内标法定量。本文共检测出13种 2.3.2 标准氨基酸的衍生化 氨基酸 。 准确称取各标准氨基酸5.00mg，用0.1mol/L 2 实验部分 的 难盐 嗡酸崛溶芙解猓，配渲制 成芍质量颗浓ǘ 度任 为 1.00g/L 的 母 标曜准 2.1 仪器和试剂 溶液。配制相同质量浓度的赖氨酸溶液作内标溶液。 仪器 日本岛津GC-16A气相色谱仪，带C- 准确吸取 1mL标准氨基酸溶液置于衍生化试 R3A数据处理机；氢火焰离子化检测器。 管中，加入等量的赖氨酸标准溶液，按参考文献 2 试剂 17种标准氨基酸 上（海康达氨基酸厂）； 方法进行酯化和酰基化处理后，取氨基酸衍生物的 苯乙烯型强酸性阳离子交换树脂 上（海医用核子仪 氯仿溶液1L进样进行色谱分析。 器厂）；3mol/L盐酸-正丁醇溶液；三氟乙酸酐； 2.3.3 分泌物中氨基酸的衍生化 CaCl2干燥的氯仿；梨木虱分泌液 河（北省农林科学 将由离子交换柱分离得到的氨基酸粗品移入5 院石家庄果树研究所采